Обнаружение, профилактика и удаление микоплазмы — все за один шаг!

Микоплазма

Микоплазма, также известная как микоплазма, является самым маленьким и простым прокариотом, обнаруженным на сегодняшний день, диаметром от 0,1 до 0,3 мкм. Она может проходить через фильтры и проявляет высокий плеоморфизм, появляясь в различных формах, таких как сферическая, стержнеобразная, нитевидная и разветвленная. В лабораториях и биофармацевтическом производстве клеточные культуры подвержены загрязнению микоплазмой. Согласно литературным данным, частота загрязнения микоплазмой хранящихся клеточных линий составляет приблизительно 15%-35%, а в биофармацевтической промышленности она колеблется от 0,44% до 6,70% ^[1].

Рисунок 1: Морфология микоплазмы

Влияние заражения микоплазмой

Бактериальное и грибковое загрязнение сравнительно легко обнаружить, предотвратить и удалить, но загрязнение микоплазмой трудно заметить. Даже при плотности роста 10^7-10^9 КОЕ/мл может не быть очевидных признаков загрязнения (таких как мутность или изменение pH). Загрязнение микоплазмой может привести к различным изменениям в клетках (см. Рисунок 2).

Рисунок 2: Изменения в состоянии клеток после заражения микоплазмой

Сценарии применения для обнаружения микоплазмы

Типичные источники заражения микоплазмой

• Перекрестное загрязнение между ячейками;
• Загрязнение рабочей среды или экспериментального оборудования;
• Несоблюдение правил асептики экспериментатором;
• Загрязнение питательных сред или других реагентов;
• Загрязнение исходной ткани или органа, использованных для приготовления клеток.

Что делать, если клеточные культуры подверглись заражению микоплазмой

Рисунок 3: Комплексное решение проблемы заражения микоплазмой

Решение «три в одном» для борьбы с микоплазменным заражением клеток

1. Обнаружение микоплазмы

Одноэтапное изотермическое обнаружение микоплазмы:

YeasenОдношаговый изотермический реагент для обнаружения микоплазмы использует уникальную технологию изотермической амплификации, предлагая более сильную цветовую дискриминацию — от сине-фиолетового (отрицательный) до небесно-голубого (положительный), — что упрощает визуальную идентификацию. Он включает в себя антиконтаминационные компоненты для устранения ложных положительных результатов.

Рисунок 4: Рабочий процесс одноэтапного обнаружения микоплазмы

Обнаружение микоплазмы методом ПЦР:

YeasenМетод обнаружения микоплазмы методом ПЦР отличается от обычной одношаговой ПЦР использованием трех пар праймеров вместо одной, нацеленных на консервативные области микоплазмы 16S и 23S для гнездовой ПЦР-амплификации. Это значительно повышает чувствительность, одновременно снижая неспецифичность, обнаруживая даже одну копию микоплазмы.

Рисунок 5: Изображение гель-электрофореза ПЦР-амплификации образцов с различными концентрациями микоплазмы

Рисунок 6: Изображение гель-электрофореза ПЦР-амплификации образцов с различными концентрациями микоплазмы

Таблица 1: Типы микоплазм, обнаруживаемые с помощью YeasenОдношаговый изотермический реагент для обнаружения микоплазмы

Примечание: Синяя секция обозначает типы микоплазм, которые можно обнаружить как с помощью одноэтапного изотермического обнаружения, так и с помощью методов ПЦР.

2. Реагент для устранения микоплазмы MycAway (1000×)

MycAway Mycoplasma Elimination Reagent (1000×) — это смешанная формула, которая эффективно устраняет микоплазму, ингибируя синтез ДНК и необходимого белка, необходимого для роста микоплазмы, не нанося вреда клеткам. Он максимально спасает ваши клетки и снижает потери из-за заражения микоплазмой.

Рисунок 7: Демонстрация эффекта элиминации клеток

Характеристики реагента для устранения микоплазм:

• Низкая токсичность: Минимальная цитотоксичность, не влияет на последующие эксперименты с клетками. такие как тестирование жизнеспособности клеток и трансфекция;
• Высокая стабильность: Может храниться при температуре -20°C в течение длительного времени, сохраняя при этом эффективность;
• Легко использовать: Просто добавьте продукт в зараженную микоплазмой питательную среду и инкубируйте;
• Быстродействующий: Видимые результаты уже через 3 дня;
• Широкий спектр: Эффективен против большинства типов лабораторных микоплазм.

Рисунок 8: Схема испытания цитотоксичности реагента для устранения микоплазмы

3. Профилактика микоплазмоза

Продукт Информация

категория	Название продукта	Номер кат.	Технические характеристики
Обнаружение	MycAway™ - набор для одноэтапного обнаружения микоплазмы в цвете	40612ES25/60	25/100 Т
	Набор для обнаружения микоплазмы методом ПЦР в реальном времени MycAway™	40618ES25/60	25/100 Т
	Набор для анализа микоплазмы методом ПЦР-анализа GMyc	40601ES10/20	10/20 анализов
Удаление	Спрей MycAway™ (готов к использованию)	40605ES02/03	1/2×500 мл
	Обработка MycAway™ (1000×) - реагент для устранения микоплазмы	40607ES03/08	1/5×1 мл
Профилактика	MycAway™Profilactic (2000×) - реагент для профилактики микоплазмоза	40608ES03/08	1/5×1 мл
	Решение MycGuard™ -1 (100×)	40609ES60	100 мл
	Раствор MycGuard™-2 (500×)	40610ES60	100 мл