D-루시페린, 칼륨염 -40902ES
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D-루시페린은 루시페라아제의 일반적인 기질이며, 생명공학, 특히 생체 내 영상 기술 전반에 널리 사용됩니다. 작용 기전은 루시페린(기질)이 ATP와 루시페라아제가 있는 상태에서 산화되어 빛을 방출할 수 있다는 것입니다. 플루오레세인이 과도할 때 생성되는 빛의 양자 수는 루시페라아제 농도와 양의 상관 관계가 있습니다(아래 그림 참조). 루시페라아제 인코딩 유전자(Luc)를 운반하는 플라스미드를 세포에 형질 도입하여 쥐와 생쥐와 같은 연구 동물에 도입했습니다. D-루시페린은 루시페라아제 및 ATP 수치 분석, 리포터 유전자 분석, 고처리량 시퀀싱 및 다양한 오염 검사를 포함한 시험관 내 연구에도 일반적으로 사용됩니다. D-루시페린(유리산), D-루시페린 염(나트륨 염 및 칼륨 염)의 세 가지 제품 형태가 있습니다. 주요 차이점은...

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D-루시페린, 칼륨염 -40902ES

Yeasen제품번호: 40902ES01
크기: 100mg
가격:
$100.00
재고:
재고 있음


D-루시페린은 루시페라아제의 일반적인 기질이며, 생명공학, 특히 생체 내 영상 기술 전반에 널리 사용됩니다. 작용 기전은 루시페린(기질)이 ATP와 루시페라아제가 있는 상태에서 산화되어 빛을 방출할 수 있다는 것입니다. 플루오레세인이 과도할 때 생성되는 빛의 양자 수는 루시페라아제 농도와 양의 상관 관계가 있습니다(아래 그림 참조). 루시페라아제 인코딩 유전자(Luc)를 운반하는 플라스미드를 세포에 형질 도입하여 쥐와 생쥐와 같은 연구 동물에 도입했습니다.

D-루시페린은 루시페라아제 및 ATP 수치 분석, 리포터 유전자 분석, 고처리량 시퀀싱 및 다양한 오염 검사를 포함한 시험관 내 연구에도 일반적으로 사용됩니다. D-루시페린(유리산), D-루시페린 염(나트륨 염 및 칼륨 염)의 세 가지 제품 형태가 있습니다. 주요 차이점은 용해도에 있습니다. 전자의 수용성과 완충액 시스템의 용해성입니다. 이들은 낮은 농도의 NaOH 및 KOH 용액과 같은 약염기에서 제외하고는 약하게 용해됩니다. 메탄올 및 DMSO에 용해됩니다. 후자는 물이나 완충액에 쉽게 용해되어 사용하기 쉽습니다.

특징

  • 방사선이 없으므로 생물체에 거의 무해합니다.
  • 생물발광, 여기 광원 없음.
  • 너무 민감해서 수백 개의 세포에서도 감지할 수 있어요.
  • 침투성이 양호하여 3-4cm 조직 깊이도 감지할 수 있습니다.
  • 높은 신호대잡음비, 강력한 형광신호, 우수한 간섭방지 기능을 갖추고 있습니다.

응용 프로그램

  • 누드 마우스를 대상으로 한 종양 형성 실험에서는 종양 제거 측정 없이 실시간으로 침습 없이 종양 성장을 관찰했습니다.
  • 종양 성장이나 전이에 대한 투여 효과를 시험하기 위해, 형광물질 기질은 약물 실험에 방해가 되지 않고 3시간 이내에 완전히 제거될 수 있습니다.
  • 동물에서 이물질 세포의 국소화와 분포가 감지되었습니다.
  • 표적 유전자 또는 표적 유전자의 프로모터는 루시퍼라제 유전자에 융합되어 약물 치료 또는 질병 진행 중에 유전자 발현의 변화를 감지합니다.
  • 줄기세포 이식, 생존 및 증식을 모니터링합니다. 생체 내에서 줄기세포의 분포와 이동을 추적합니다.

명세서

영어 동의어 (S)-4,5-디하이드로-2-(6-하이드록시-2-벤조티아졸릴)-4-티아졸카르복실산 칼륨염; D-루시페린 반딧불이, 칼륨염
CAS 번호 115144-35-9
공식 C11H7N2O3S2K
분자량 318.42g/몰
모습 연한 노란색 분말
용해도 물에 용해됨(60 mg/mL)

구성 요소

구성품 번호 이름 40902ES01 40902ES02 40902ES03 40902ES08
40902 D-루시페린, 칼륨염 100mg 500mg 1g 5g


그림

"Phosphoglycerate Mutase 1의 새로운 알로스테릭 억제제는 비소세포 폐암의 성장 및 전이를 억제합니다, Cell Metab. 2019;30(6):1107-1119에서 인용

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서류:

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매뉴얼

40902_매뉴얼_HB221103_KO.pdf


인용 및 참조:

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Storage

The product is shipped with dry ice and can be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

There is no difference. The three are merely variations in naming by different companies, and they are all compounds (S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2 -thiazoline-4-carboxylic acid
Besides being used for in vivo imaging, fluorescent dye products are also employed in other applications involving luciferase, such as in vitro reporter gene assays, microbial/viral monitoring, pyrosequencing, etc.
Sodium fluorescein: It can be used for cell permeability testing. The permeability of the pigment can be determined by measuring the absorbance value at OD490. D-fluorescein sodium salt: Used for in vivo imaging and reporter gene systems. It is detected through a cold luminescence module and does not require excitation light stimulation.
The main differences among the three are as follows:
1) Solubility: The salt form is easily soluble in water. The solubility of potassium salt is 60mg/ml, and that of sodium salt is 100mg/ml. Free acid is not easily soluble in water. It can be dissolved by a weak alkaline solution of sodium bicarbonate, and its solubility in methanol is 10mg/ml, and in DMSO is 50mg/ml.
2) Toxicity: The salt form is more convenient to use during the process, especially in in vivo imaging experiments, as it can dissolve in water and the reaction toxicity will be smaller (Fluorescein is a low-molecular-weight organic compound composed of phenylthiazole and thiazole carboxyl group, with low toxicity).
3) Usage effect: There is no significant difference. In in vivo experimental studies, the usage rate of potassium salt is higher.
It has an impact. The purity is above 99%, with a good level of 99%. For 99% pure fluorescein, there is 1% solid impurity. If this 1 gram of impurity is dissolved in 25 ml of buffer solution (this dilution ratio is the standard dilution method for in vivo imaging experiments), the concentration of the impurity at this time is 0.4 g/L. Assuming the molecular weight of the impurity is 1000 g/mol, then the molar concentration of the impurity is 400 μM. This concentration may inhibit the action of certain enzymes in the cells and may reduce the experimental effect or cause harm to the animals.
The powder should be stored in a dark place at -20 or -70 degrees Celsius. Its validity period is at least one year.
D-fluorescein (D-Luciferin) is a commonly used substrate for luciferase. Its mechanism of action is that under the action of ATP and luciferase, the fluorescent substance (the substrate) can be oxidized and emit light. When there is an excess of fluorescent substance, the number of photons produced is positively correlated with the concentration of luciferase.
2. Native coelenterazine is an action substrate for various luciferases such as sea kidney luciferase (Rluc) and Gaussia luciferase (Gluc).
Recommended instruments:
1. Instruments with a biochemiluminescence detection module. The light produced by luciferin can be detected by a photometer or a scintillation counter. Common in vivo imaging instruments: such as the IVIS® Lumina small animal in vivo imaging system, the In-Vivo Xtreme multi-mode small animal in vivo imaging instrument from Bruker, Germany.
2. Multi-functional microplate readers: It is necessary to confirm with the instrument manufacturer whether it is a specific biochemiluminescence detection module (note: cannot use a fluorescence microscope).
Fluorescein is a small molecule with excellent water solubility and lipid solubility. It can easily penetrate the cell membrane and the blood-brain barrier.
Either one is fine. Intraperitoneal injection has a slower diffusion rate and the light emission lasts longer; intravenous injection has a faster diffusion rate, but the light emission lasts for a very short period of time.
Intraperitoneal injection (i.p.), with a fluorescein concentration of 150 mg/kg per kg of body weight. Taking a 20g C57 mouse as an example, the dosage for each mouse for one test: 150 mg/kg × 20g = 3mg, 100mg ÷ 3mg = 33 mice. This is for reference only. The specific dosage should be based on the reagent and without any loss.
Generally speaking, potassium d-fluorescein does not cause any toxic effects on animals.
There is no such information.
This product undergoes in vitro imaging. The ATP and magnesium ions required for this process need to be achieved through the cell culture medium. Therefore, a cell culture medium containing ATP and magnesium ions needs to be added to dilute the probe;
2. The cells themselves also contain a certain amount of ATP and magnesium, which can promote the reaction. In most cases, the ATP and magnesium contained in the cells are sufficient for the reaction of D-fluorescein salt, but the content varies depending on the type of cells. You can first try using a culture medium without additional ATP and magnesium, and conduct the experiment normally to see the results.
Chemiluminescence, no excitation wavelength required. The detection wavelength for firefly luciferin is 560 nm. The detection wavelength for sea kidney luciferin is 465 nm.
It can pass through the blood-brain barrier, the placental barrier and the blood test barrier, and also enter living cells.
The recommended concentrations are derived from the literature:
1) Injection method: It can be done through intraperitoneal injection or tail vein injection.
2) Injection volume: The scientific approach is to evaluate the injection dose based on the kinetic curve. The initial attempted injection dose is: 150mg substrate/kg of mouse body weight. Therefore, the purchase quantity can be calculated according to the above method: If there are 10 mice, 22 - 25g, then 33 - 37.5mg of substrate is required.
Approximately 3 minutes after intraperitoneal injection of fluorescein into mice, cells expressing luciferase began to emit light. The intensity reached a stable peak after 10 minutes, and this peak lasted for about 10 - 15 minutes before gradually diminishing. Detection can be conducted within 10 - 15 minutes after the injection. This is for reference only. It is recommended to conduct a preliminary experiment to establish the kinetics curve of luciferase, thereby determining the optimal time for signal detection and the signal plateau period.
To successfully conduct the in vivo imaging experiment, the following conditions are required: The target tissue or cells must express the luciferase gene; the injection of the luciferin substrate must be successful; and the thickness of the tissue at the luminescent site is also a factor. If the experiment fails, the reasons can be investigated from these aspects: whether the luciferase gene is expressed, whether the luciferin substrate was injected correctly, and whether the luminescent site is deep.

Citations

Documents

Brochure
In_vivo_imaging_Leaving_Tumor_Cells_Nowhere_to_Hide.pdf

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