생물학적 제제 생산에는 종종 세포 배양 또는 조직 배양이 포함되며, 이때 태아 우혈청은 세포 성장에 필수적인 영양소를 공급하는 데 널리 사용되고, 태아 우혈청에는 일정량의 BSA(소 혈청 알부민)가 함유되어 있습니다. 생산되는 약물의 안전성을 고려하여, 백신, 항체 의약품, 조직 공학 제품, 세포 및 GCT와 같은 생물학적 제제 생산 시 혈청 함유 배지를 대체하기 위해 무혈청 배지가 점차 사용되고 있습니다. 이는 혈청으로 인해 발생할 수 있는 바이러스 오염과 같은 잠재적 위험을 최소화하기 위한 것입니다. 이 중 무혈청 배양 배지는 대부분 소 혈청 알부민(BSA), 트랜스페린, 인슐린과 같이 혈청의 기능을 대체할 수 있는 다양한 생체 분자로 구성됩니다. 결과적으로 BSA는 혈청 함유 배지와 무혈청 배지 모두에 존재하며, 대부분의 불순물 단백질은 정제 및 기타 생산 단계를 통해 제거되지만, 최종 생물학적 제제에는 미량의 외인성 단백질(예: BSA 등)이 여전히 존재합니다.

BSA는 외인성 단백질로서 인체에 유입되면 심각한 알레르기 반응을 일으킬 수 있어 생물학적 제제의 안전성에 영향을 미칠 수 있습니다. 2020년판 중국 약전(제3부)에서는 다양한 백신의 BSA 잔류량을 규정하고 있는데, 기본적으로 50ng/mL 이하 또는 50ng/회 이하입니다.

ELISA는 BSA 잔류물 검출을 위한 사용하기 쉽고 민감하며 객관적인 방법입니다. 이 키트는 이중 항체 샌드위치 효소 결합 면역 흡착 검사(샌드위치 ELISA)의 원리를 사용하여 샘플에서 잔류 BSA를 검출합니다 . 먼저 BSA 표준 ( 36722-B ) 과 테스트 샘플을 Anti- BSA 코팅된 마이크로타이터 스트립 (36722-A) 에 추가한 다음 희석된 HRP 표지 BSA 검출 항체(36722-C)를 추가하여 항체 + 항원 + 항체-HRP 복합체를 형성합니다. HRP 복합체를 형성한 후 플레이트를 세척하고 TMB 발색 혼합물(36722-E + 36722-F)을 추가하여 색상을 발현합니다. TMB는 HRP 효소에 의해 촉매되어 무색에서 파란색으로, 최종적으로 종결 용액(36722-G)의 작용으로 노란색으로 변합니다. 노란색의 음영은 샘플에서 검출된 BSA의 양과 양의 상관 관계가 있습니다. 이 키트는 생물학적 정제 공정의 최적화, 중간 공정의 불순물 제어, 최종 제품 출시 테스트에 사용할 수 있습니다.

이 키트의 검출 범위 는 1.5625 ng/mL~50 ng/mL 이고 , 하한 검출 한계는 ≤1ng/mL 입니다 .

특징

엘  높은 민감도: 진행 중 및 최종 생물학적 샘플에서 최소 1ng /mL의 BSA 잔류물을 감지합니다.

엘  정확성 보장: BSA 잔류물은 75 %-1.25 % 의 회수율로 정확하게 감지할 수 있습니다 .

엘   특이성: 다른 외인성 단백질의 간섭 없이 BSA 를 특이적으로 감지합니다 .

엘  안정성: 로트 간 차이가 적고, 키트 속성은 7 일 동안 37℃에서 영향을 받지 않습니다.

엘  간편한 신호 수집: HRP- 비오틴 시스템을 사용하면 신호를 안정적으로 확대할 수 있습니다.

애플리케이션

엘  생물학적 제품의 잔류 BSA 테스트

명세서

제품 성능

구성 요소

저장

본 제품은 2°C ~8°C에 보관하십시오. 미개봉 제품은 1년간 유효합니다.

* 키트를 수령하시면 모든 구성품이 완벽한지 확인하시고, 즉시 해당 상태로 보관해 주시기 바랍니다.

수치

정밀 디스플레이​

에이) 반복성

비) 중간 정밀도

표 1. BSA ELISA의 정확도는 위의 계획에 따라 분석되었습니다.

10개의 중복된 샘플을 표준 곡선에서 3가지 농도로 테스트하였고, 모든 CV%가 10% 미만이었습니다(표 1A). 3개의 BSA ELISA 키트 로트를 테스트하였고, CV%가 10% 미만이었습니다(표 1B).

정확도 검증

고객이 제공한 4개 샘플에서 BSA 잔류물에 대한 초기 테스트를 실시한 후, BSA 함량이 표준 곡선 범위 내에 있는 것으로 측정되었고, 이어서 샘플 스파이크 회수 테스트를 실시했습니다.

검사 대상 샘플 4개(TS라고 함)에 10ng/mL BSA 표준물질을 중간 비율로 첨가하고, 샘플 스파이크 회수율 시험을 수행했습니다. 그 결과, 스파이크 회수율은 모두 80%에서 120% 범위에 있었습니다.

스파이크 회수율(%) = (스파이크된 샘플의 측정값 - 스파이크되지 않은 샘플의 측정값)/이론적 값(스파이크된 표준의 양) * 100%.

표 2. 정확도 검증

서류:

안전 데이터 시트

36722_MSDS_HB250310.pdf

매뉴얼 

36722_매뉴얼_버전 EN20250310.pdf