폴리아크릴아마이드 겔(PAGE 겔)은 단백질 전기영동을 통해 단백질을 분리하는 데 자주 사용됩니다. 이러한 겔은 일반적으로 농축 겔과 분리 겔로 구성됩니다. 농축 겔은 단백질 시료를 농축하는 역할을 하고, 분리 겔은 겔에 사용된 아크릴아마이드 단량체와 N,N-메틸렌비스아크릴아마이드(메틸렌아크릴아마이드) 가교제의 농도에 따라 크기가 다른 단백질을 분리합니다.

이 키트는 PAGE 겔을 빠르게 제조하는 데 필요한 다양한 시약을 제공합니다. 사용자는 겔 제조를 위해 겔 제조 장비만 준비하면 되므로 겔 제조 과정이 크게 간소화됩니다. 이 키트로 제조된 겔은 변성 PAGE 겔 전기영동에만 사용할 수 있습니다. 이 사양은 약 125개의 미니 겔(0.75mm 두께 겔 기준)을 제조할 수 있습니다.

명세서

구성 요소

배송 및 보관

제품은 얼음팩과 함께 배송되며 2 ℃ ~8 ℃ 에서 1년간 보관이 가능합니다.

지침: 상부 용액을 너무 늦게 첨가하지 않도록 한 번에 너무 많은 젤 조각을 구성하지 않는 것이 좋습니다(최대 2~3개 권장)

1. 목표 단백질의 분자량에 따라 적절한 겔 농도를 선택합니다(표 1 참조)

2. 젤 만들기 과정 (0.75/1.0/1.5 mm 미니 젤을 예로 들어보겠습니다)

2.1 분리겔 완충액과 분리겔 용액을 동일한 양으로 취하여 섞습니다. 즉, 두 용액을 각각 2.0/2.7/4.0 mL씩 취합니다.

2.2 과황산암모늄 0.1g을 달아 탈이온수 1mL에 녹입니다. 과황산암모늄은 고객이 직접 구매해야 합니다.

2.3 1단계의 혼합 용액에 35/45/70 μL의 APS를 첨가합니다(응고가 너무 빠르면 APS 사용량을 절반으로 줄일 수 있습니다).그리고 완전히 혼합합니다.

2.4 2단계의 용액을 겔 형성 유리판에 주입합니다. 분리 겔을 첨가한 후 2분 이내에 농축 겔을 겔 몰드에 주입해야 하며, 농축 겔과 분리 겔이 섞이지 않도록 천천히 주입해야 합니다. 만약 사용자가 직접 주입하기 어려운 경우, 에탄올로 밀봉한 후 농축 겔을 주입하도록 조정할 수도 있습니다.

2.5 농축 겔의 준비: 농축 겔 완충액과 농축 겔 용액을 동일한 양으로 취합니다. 즉, 두 용액을 각각 0.5/0.75/1.0 mL씩 취한 다음 10/13/18 μL APS를 첨가하고 잘 섞습니다.

2.6 겔 제조용 유리판에 주입하고 빗살을 삽입합니다(빗살을 조심스럽게 삽입할 때 과도한 힘을 주지 마세요).

2.7 농축 겔이 15분간 고형화된 후, 빗살을 제거하여 전기영동에 사용할 수 있습니다. 참고: 새로 제조한 전기영동 완충액을 사용해 주십시오.

노트

1. 전기영동 중 전압은 100~120V 사이가 권장됩니다. 전기영동 속도를 높여야 하는 경우 150V까지 높일 수 있습니다.

2. 젤을 채우기 전에 젤 용액의 온도를 실온으로 맞춰야 합니다(예: 몇 분간 그대로 두는 것). 이렇게 하면 젤에 거품이 형성되는 것을 효과적으로 방지할 수 있습니다.

3. 과황산암모늄은 고객이 직접 구매해야 합니다. Sigma의 Cat#A3678 제품을 사용하는 것이 좋습니다.

4. 과황산암모늄 용액의 양은 참고용이며, 실제 양은 개인의 실험 습관과 경험에 따라 증감할 수 있습니다. 과황산암모늄을 더 많이 첨가하면 겔 속도가 빨라지고, 그 반대의 경우도 마찬가지입니다. PAGE 겔의 응고 속도는 온도와 과황산암모늄의 양과 밀접한 관련이 있습니다.

5. 본 제품에는 적정량의 TEMED 대체제가 첨가되어 있습니다. 겔 속도를 더욱 높여야 하는 경우, 조제 전 필요에 따라 적정량의 TEMED를 첨가할 수 있습니다.

6. 겔 응고와 온도 사이에는 유의미한 양의 상관관계가 있습니다. 동일한 조건에서 온도가 높을수록 응고 속도가 빨라집니다.

7. 컬러 농축 젤은 보관 중 소량의 침전물이 발생할 수 있습니다. 이는 정상적인 현상입니다. 안심하고 사용하세요.

8. APS는 -20 ℃ 에 보관되었습니다 . 편의상 개봉 후 사용 중인 APS는 4 ℃ 에 보관할 수 있습니다 .

9. 건강과 안전을 위해 실험실 가운과 장갑 등 필요한 개인 보호 장비를 착용해 주세요 !

10. 연구용으로만 사용하세요!

표 1 농도에 따른 SDS-PAGE 겔의 기준 분리 범위

 서류:

안전 데이터 시트

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20324-B-MSDS-CN20250110

20324- C -MSDS-CN20250110

20324- D -MSDS-CN20250110

매뉴얼

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인용 및 참조:

[1] Chen X, Zhang D, Su N, et al. 밝고 안정적인 형광 RNA를 사용하여 살아있는 세포에서 RNA 역학을 시각화합니다. Nat Biotechnol. 2019;37(11):1287-1293. doi:10.1038/s41587-019-0249-1(IF:31.864)