자성 잔류 DNA 시료 전처리 키트는 다양한 생물학적 시료의 잔류 DNA 전처리에 적합합니다. 특수 자성 비드와 세심하게 최적화된 완충액 시스템을 사용하여 시료 내 미량의 숙주 세포 잔류 DNA 분리 및 정제를 극대화할 수 있습니다.

자기 잔류 DNA 샘플 준비 키트는 CHO 숙주 세포 DNA 잔류물 검출 키트(Cat#41301ES), HEK293 숙주 세포 DNA 잔류물 검출 키트(Cat#41302ES), Vero 숙주 세포 DNA 잔류물 검출 키트(Cat#41303ES), E.coli 숙주 세포 DNA 잔류물 검출 키트(Cat#41304ES)를 포함한 다양한 숙주 세포 잔류 DNA 검출 키트와 함께 사용할 수 있습니다.

예센 마이코플라스마 오염에 대한 종합적인 솔루션을 제공합니다 . 관련 제품 살펴보기: 마이코플라스마의 개념과 오염의 영향

제품 구성 요소

배송 및 보관

1. 1부는 얼음팩과 함께 배송되며, 1년간은 4°C, 장기 보관 시에는 -20°C에서 보관 가능합니다.

2. 2부는 실온으로 운송되며, 실온 보관은 1년간 가능합니다.

3. 제3부는 건조 얼음에 담겨 배송되며 -20°C에서 1년간 보관됩니다.

4. 상품을 수령하신 후, Part I, Part II, Part III의 3가지 구성품이 모두 완전한지 확인하시고, 즉시 해당 보관 온도에 보관하시기 바랍니다.

주의 사항

1. 사용 전에 사용 설명서를 주의 깊게 읽고, 사용 설명서를 엄격히 준수하여 사용하십시오. 샘플 처리는 클린 벤치 또는 생물 안전 캐비닛에서 수행하는 것이 좋습니다.

2. 실온에 보관한 용액에 침전이나 탁도가 있는지 주의 깊게 관찰하세요(특히 겨울과 같이 실온이 낮을 때). 용액이 맑아질 때까지 37°C의 수조에 담가두면 사용 효과에 영향을 미치지 않습니다.

3. 용출 과정에서 자기 비드가 잔류할 수 있으므로, 시료 채취 시 자기 비드를 흡입하지 않도록 주의하세요.

4. 이 제품을 사용할 때는 교차 오염을 방지하기 위해 팁을 자주 교체하세요.

5. 안전과 건강을 위해 이 제품을 사용할 때는 실험실 가운, 일회용 장갑 등 개인 보호 장비(PPE)를 착용하세요.

6. 이 제품은 연구용으로만 사용하세요!

사전 준비

1. 자체 제공 장비: 교반기, 수조 또는 금속조, 원심분리기, 자기 분리 랙, Hangzhou Aosheng Auto-Pure32A 자동 핵산 추출기 또는 기타 브랜드의 전자동 핵산 추출기.

2. 자체 제공 소모품: 10μL-1000μL 저흡착 필터 팁, 1.5mL 저흡착 원심분리관, PCR 튜브 또는 96웰 플레이트 및 해당 튜브 캡 또는 멤브레인.

3. 자체 준비 시약: 절대 에탄올(분석용), 1×PBS 완충액(pH 7.4, Mg 및 Ca 이온 없음), 초순수.

4. 처음 사용할 때는 라벨이나 사용 설명서에 표시된 용량의 무수 에탄올을 세척액 A*와 세척액 B* 병에 넣고 사용 전에 완전히 섞은 후, 표시를 잘 하십시오. 사용 후에는 병뚜껑을 꼭 닫아 병 안의 에탄올 농도를 유지하십시오.

수동 잔류 DNA 추출

1. 샘플 처리

1.1 샘플에 백신과 같이 비교적 높은 DNA 함량이 포함되어 있는 경우 1×PBS 완충액(pH 7.4, Mg 및 Ca 이온 없음)으로 적절한 비율로 희석한 다음 추출합니다(샘플 희석은 검출 값이 표준 곡선의 선형 범위 내에 있도록 하여 검출 정확도를 확보하기 위한 것이며 일반적으로 100배 희석을 고려할 수 있습니다).

1.2 검사할 시료가 건조분말인 경우 사용 전 초순수를 사용하여 10mg/mL 또는 100mg/mL로 희석합니다.

1.3 샘플에 복잡한 매트릭스가 있는 경우, 적절한 희석률을 결정하기 위해 표준 첨가 및 회수 실험을 수행해야 합니다.

2. 1.5mL 튜브에 100 μL의 샘플을 넣은 후, 100 μL의 용해 완충액, 10 μL의 단백질 분해 효소 K를 넣고 흔들어 섞은 후 10초간 혼합합니다.

[참고사항]: 단백질 시료 농도가 0~100 mg/mL일 경우 10 μL의 단백질 분해효소 K를 첨가하고, 단백질 시료 농도가 100~200 mg/mL일 경우 20 μL의 단백질 분해효소 K를 첨가합니다.

3. 60°C에서 20분간 배양합니다.

4. 그런 다음 결합 용액 400 μL, 글리코겐 9 μL, 폴리 A 칼륨 염 6 μL를 첨가하고 볼텍싱하여 잘 섞습니다.

5. 마그네틱 비드 20 μL를 넣고 잘 흔들어 섞은 후 10분간 그대로 두세요. 3분마다 10초씩 흔들어 섞으세요.

[참고]: 자석 비드가 완전히 재현탁되도록 사용 전에 볼텍싱(vortexing)을 해야 합니다. 샘플을 한 번에 4~5회 첨가한 후 다시 혼합하는 것이 좋습니다.

7. 용액을 가라앉히기 위해 잠시 원심분리한 후, 원심분리 튜브를 자석 랙에 1~2분간 올려놓습니다. 자석 비드가 완전히 흡수되면 용액을 조심스럽게 제거합니다.

8. 세척 용액 A 500 μL를 첨가합니다(사용 전에 절대 에탄올이 첨가되었는지 확인하십시오). 흔들거나 소용돌이치며 혼합하여 자기 비드가 분산되고 원심 분리 튜브 벽에 자기 비드가 뭉쳐 있지 않은지 확인합니다.

9. 잠시 원심분리한 후, 원심분리 튜브를 자석 랙에 1~2분간 올려놓습니다. 자석 비드가 완전히 흡수되면 액체를 조심스럽게 제거합니다.

10. 세척 용액 B 500 μL를 첨가합니다(사용 전에 절대 에탄올이 첨가되었는지 확인하십시오). 흔들거나 소용돌이치며 혼합하여 자기 비드가 분산되고 원심 분리관 벽에 자기 비드가 뭉치지 않았는지 확인합니다.

11. 잠시 원심분리한 후, 원심분리 튜브를 자석 랙에 1~2분간 올려놓습니다. 자석 비드가 완전히 흡수되면 액체를 조심스럽게 제거합니다.

12. 잔류 액체를 최대한 제거하기 위해 튜브를 10초간 빠르게 원심분리한 후 자석랙에 놓고 10 μL 피펫을 사용하여 잔류 액체를 흡입합니다.

13. 튜브 뚜껑을 열고 에탄올이 완전히 증발할 때까지 3분간 실온에 두십시오. 자석 비드 표면에 반사나 균열이 나타나지 않으면 에탄올이 완전히 증발한 것입니다.

14. 튜브를 자석 스탠드에서 꺼내고, 65°C에서 예열된 용출액 50~100 μL를 넣고 잘 흔들어 섞습니다. 잠시 원심분리한 후, 65°C에서 5분간 배양합니다. 2~3분마다 한 번씩 흔들어 섞습니다.

15. 다시 짧게 원심분리한 후, 원심분리 튜브를 자석 스탠드에 2분간 올려놓습니다. 자석 비드가 완전히 흡착되면 DNA 용액을 새 원심분리 튜브에 조심스럽게 옮겨 -20°C에 보관하고, 장기 보관 시에는 -80°C에 보관합니다.