설명
Hieff Unicon TM Universal Superfast qPCR Mix (One Tube)는 당사의 차세대 항체 매개 핫스타트 Ta q DNA 중합 효소를 사용하는 형광 정량 qPCR 프리믹스입니다. 이 제품은 광범위한 적용 가능성과 빠른 프로토콜을 지원하며, 완전 사전 혼합된 형태로 제공됩니다.
특징
- 빠른 프로토콜을 지원합니다. 결과는 단 20분 만에 나옵니다.
- 우수한 프리믹스 안정성: 37°C에서 7일간, 동결-해동 사이클 20회 후에도 안정적입니다.
- DNA 잔류물 함량 낮음: 48개 웰에서 E. coli, P. aeruginosa 또는 인간 게놈 DNA의 잔류 DNA가 검출되지 않았습니다.
- 광범위한 시약 호환성: 40가지 이상의 멀티플렉스 프라이머/프로브와 호환되며, 지속적으로 안정적인 증폭을 제공합니다.
- 높은 민감도와 특이성: 최소 200개/mL까지 검출 가능; 48개 음성 샘플에서 거짓 양성 결과가 나오지 않음.
- dUTP/UDG 오염 방지 시스템: 에어로졸 오염을 효과적으로 방지하기 위해 dUTP/UDG 시스템을 통합했습니다.
- 다양한 플랫폼 및 시스템과 호환 가능: Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, SLAN 등에서 검증됨
구성 요소
|
이름 |
16924ES60 (100톤) |
16924ES80 (1000톤) |
16924ES92 (10000톤) |
|
2×초고속 qPCR 믹스 |
1.25mL |
12.5mL |
125ml |
저장
본 제품은 -25~-15℃에서 1 년간 보관하시기 바랍니다 .
애플리케이션
- 긴급 검사 (예: 감염병 탐지, 중환자 진단)
- 고성능 테스트(예: 질병 검사, 병원균 검사, 바이러스 감지)
- 정기 검사(예: 식품 미생물 검출).
수치
1. qPCR 플랫폼 전반에 걸친 탁월한 증폭 성능
그림 1. 빠른 사이클링 프로토콜을 사용한 N. meningitidis와 S. pneumoniae의 증폭 효율 테스트.
(A) ABI 7500 고속 모드: N. meningitidis(R² = 0.999, Eff = 99.864%), S. pneumoniae(R² = 1.000, Eff = 98.952%)
(B) ABI Q5 고속 모드: N. meningitidis(R² = 0.999, Eff = 99.14%), S. pneumoniae(R² = 1.000, Eff = 99.756%)
2. 고속 qPCR 프로그램과 기존 qPCR 프로그램에서의 탁월한 증폭 성능
|
기구 |
슬랜 |
체계 |
5 μL DNA (총 용량 25 μL) |
|
주형 |
박테리아 플라스미드 템플릿(B-튜브 및 P-튜브). |
템플릿 농도 |
Ct 30-35 |
|
프로그램 |
기존 프로그램(96S/48S): 95°C 5분；40사이클(95°C 15초；60°C 30초)--50분 빠른 프로그램(48S Fast): 95°C 15초；40 사이클(95°C 2초；60°C 8초)--20분 |
||
표 1. 고속 및 일반 프로그램에서 16924의 민감도 평가
|
16924 |
그룹 B |
그룹 P |
||||||
|
형광 채널 |
가족 |
빅 |
록스 |
가족 |
빅 |
CY5 |
록스 |
|
|
96S-기존 프로그램 |
평균 Ct 값 |
36.16 |
36.13 |
33.23 |
35.61 |
38.81 |
해당 없음 |
36.03 |
|
탐지율 |
16/16 |
16/16 |
16/16 |
12/16 |
13/16 |
0 |
15/16 |
|
|
형광 채널 |
가족 |
빅 |
록스 |
가족 |
빅 |
CY5 |
록스 |
|
|
48S-Fast 프로그램 |
평균 Ct 값 |
36.54 |
36.31 |
33.54 |
36.46 |
39.14 |
36.87 |
36.31 |
|
탐지율 |
16/16 |
16/16 |
16/16 |
14/16 |
11월 16일 |
2/16 |
13/16 |
|
|
형광 채널 |
가족 |
빅 |
록스 |
가족 |
빅 |
CY5 |
록스 |
|
|
48S-기존 프로그램 |
평균 Ct 값 |
36.30 |
36.34 |
33.77 |
35.54 |
38.73 |
39.41 |
35.58 |
|
탐지율 |
16/16 |
16/16 |
16/16 |
14/16 |
9월 16일 |
10월 16일 |
14/16 |
|
그림 2. 기존 프로그램과 빠른 프로그램을 사용한 16924와 공급업체 A*의 성능 비교.
4-플렉스 플라스미드 주형 두 세트(B-튜브와 P-튜브)를 16924와 공급업체 A*를 사용하여 비교적 높은 주형 농도(Ct 30~35)에서 시험했습니다. 공급업체 A*는 P-튜브 주형의 고속 프로그램 하에서 Ct 값에 1주기 이상의 지연을 보인 반면, 16924는 프로그램 간에 유의미한 차이를 보이지 않았습니다. 16924의 일부 표적은 고속 프로토콜에서 더 일찍 증폭되었습니다.
3. 강력한 안정성
그림 3. 실제 샘플(싱글플렉스)에서 추출한 ASFV 핵산을 사용한 16924 프리믹스의 안정성 테스트.
열 가속 안정성 시험은 프라이머 및 프로브와 혼합된 16924 프리믹스를 37°C에서 7일 동안 배양하여 수행되었습니다. qPCR 조건: 95°C에서 90초; 95°C에서 5초, 55°C에서 30초를 45회 반복. 결과는 프리믹스가 배양 후에도 일관된 Ct 값과 증폭 곡선을 유지하여 안정적인 성능을 유지함을 보여주며, 이는 우수한 열 안정성을 나타냅니다.
4. 높은 억제제 내성
그림 4. 다양한 완충액에 희석한 4-플렉스 플라스미드 템플릿을 사용하여 16924와 상용 제품(공급업체 A)의 비교 성능을 나타낸 것입니다.
TE 완충액과 식염수를 포함한 다양한 용액에 희석된 템플릿을 16924와 공급업체 A*를 사용하여 시험했습니다. 그 결과, 16924는 다양한 희석 완충액, 특히 식염수에 대한 내성이 더 뛰어나 완충액 제한 조건이나 현장 기반 환경에서 더욱 신뢰할 수 있는 검출 성능을 제공하는 것으로 나타났습니다.
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