설명
리보뉴클레아제 R(RNase R) 대장균 은 마그네슘 의존성 3'→5' 엑소리보뉴클레아제입니다. 모든 선형 RNA는 소화할 수 있지만, 라리아트 또는 원형 RNA 구조는 소화하지 못합니다. tRNA, 5S RNA, 인트론 라리아트를 제외한 대부분의 세포 RNA는 RNase R에 의해 완전히 소화됩니다. RNase R은 생물학적 시료에서 circRNA 농축, 인트론 라리아트 서열 확인, 엑손 circRNA 확인, 선택적 스플라이싱 연구에 사용됩니다.
특징
ISO 13485 인증을 통해 효능과 품질이 보장됩니다.
대량 또는 맞춤형 구성으로 이용 가능합니다.
선형 RNA를 효과적으로 분해하는 동시에 라리아트 루프와 원형 RNA를 보존합니다.
선형 RNA의 선택적 소화는 단백질 생산이나 인트론 cDNA 라이브러리 구축을 위한 원형 RNA의 분리를 향상시킵니다.
GMP 등급 RNAse R 제공
세부 사항
| 원천 | E. coli의 RNAse R 유전자를 운반하는 재조합 E. coli 균주 |
| 최적 온도 | 37도 |
| 저장 버퍼 | 50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton® X-100, 1 mM DTT, 50% 글리세롤, pH 7.5, 25℃ |
| 단위 정의 | 1단위는 37°C에서 20 mM Tris-HCl(pH 8.0), 100 mM KCl 및 0.1 mM MgCl 2 에서 1 μg의 폴리-r(A)를 10분 안에 산에 녹는 뉴클레오티드로 전환합니다. |
애플리케이션
RNase R은 원형 RNA 합성(circRNA)의 기본 구성 요소입니다. CircRNA는 약물 안정성과 생체 안정성을 향상시키는 데 유망합니다. 공유 결합으로 닫힌 구조를 가진 circRNA는 RNA 엑소뉴클레아제에 대한 내성을 가지고 있습니다. [1,2] RNase R은 선택적 스플라이싱, 인트론 cDNA 생성, 스플라이싱 중간체 및 라리아트 분리 등 다양한 연구에 널리 활용되고 있습니다.
구성 요소
|
구성품 번호 |
이름 |
14615ES25 |
14615ES72 |
14606ES80 |
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14615 |
RNase R(GMP 등급, 20 U/μL) |
25 μL |
250 μL |
1mL |
저장
본 제품은 -25~-15℃에서 2년간 보관하시기 바랍니다.
지침
멸균된 마이크로 원심분리관에서 다음 반응 시스템을 준비하십시오.
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요소 |
용량 |
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10×RNase R 반응 완충액 |
2 μL |
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RNA 샘플 |
1 μg |
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RNase R(20 U/μL) |
2-4 U |
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RNase가 없는 ddH 2 O |
최대 20개 μL |
37℃에서 10~30분간 배양합니다.
수치
그림 1: 총 mRNA(C)는 Yeasen RNAse R로 분해될 수 있습니다. 총 mRNA 입력: 500ng.
그림 2: CircRNA는 Yeasen RNAse R로 소화될 수 없습니다. CircRNA 입력: 500ng, RNAse R: 4U.
그림 3: 1μg의 선형 mRNA에 대한 Yeasen RNAse R(1U~8U) 소화 성능(C).
노트
- RNase R의 활동에는 0.1-1.0 mM Mg 2+ 가 필요합니다.
- RNA의 증가에 따라 반응시간을 연장할 수 있으며, 효소의 양도 적절히 증가시킬 수 있다.
- RNA 샘플의 EDTA 함량은 RNase R의 활성에 영향을 미칠 수 있습니다.
- 70℃에서 10분간 배양하면 효소가 불활성화될 수 있습니다.
참조
- Qu L, Yi Z, Shen Y, 외. SARS-CoV-2 및 새로운 변종에 대한 원형 RNA 백신. 셀. 2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
- Chen L, Wang C, Sun H 외. circRNA 발견 및 분석을 위한 생물정보학 도구. Brief Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001
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자주 묻는 질문
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