히프™ 다재다능성 T4 DNA 리가제는 T4 DNA 리가제의 변종입니다. 이 효소는 응집성 또는 평활 말단 분자 간의 연결 반응을 촉매하는 데 적합합니다. 차세대 시퀀싱(NGS)의 라이브러리 제작 과정에서 DNA 단편과 어댑터를 연결하도록 설계된 단일 효소 제품입니다. Hieff ® 다재다능한 T4 DNA 리가제는 고처리량 시퀀싱을 통해 광범위하게 검증되었으며 뛰어난 품질을 보여줍니다.

특징

• 고충실도
• 내열성

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명세서

구성 요소

저장

본 제품은 -25~-15℃에서 2일간 보관하시기 바랍니다. 연령.

수치

노트

1. 안전을 위해 실험실 가운과 일회용 장갑 을 착용하고 작업해 주시기 바랍니다.

2. 완충액에 소량의 침전물이 생기는 것은 정상적인 현상입니다. 사용 전에 완충액을 뒤집어 완전히 섞어주세요.

3. 본 제품은 연구용으로만 사용됩니다.

규약

1. 라이게이션 기반 방법을 사용하는 현재 주류 DNA 라이브러리 제작 키트는 일반적으로 말단 복구 및 A-테일링 후 정제 단계가 필요하지 않습니다. DNA 단편은 정제 과정 없이 어댑터 라이게이션을 통해 직접 처리됩니다. 이 키트는 주류 DNA 라이브러리 제작 키트와 호환됩니다. 원활한 어댑터 결찰을 위한 상업적으로 이용 가능한 끝단 수리 및 A-테일링 시스템.

얼음 위에 있는 마이크로 원심분리관에 다음 반응을 일으키고, 피펫팅이나 흔들어 가볍게 섞습니다. 잠깐 원심분리하고 20°C에서 15분 동안 열을 가해 불활성화합니다.

표 1. 어댑터 결찰을 위한 반응 시스템

【 참고 】 * 50% PEG6000 용액은 키트에 포함되어 있지 않으므로 직접 준비해야 합니다.

**표를 참조하세요 2 를 위해 어댑터의 양.

***필요에 따라 T4 DNA 리가제의 양을 3-5 μL 추가할 수 있습니다.

2. 어댑터 농도는 라이게이션 효율과 라이브러리 수율에 직접적인 영향을 미칩니다. 어댑터를 과도하게 사용하면 다음과 같은 문제가 발생할 수 있습니다. ~에 어댑터 다이머가 더 많은 반면, 사용량이 낮으면 연결 효율성과 라이브러리 생성에 영향을 미칠 수 있습니다. 표 2 다양한 양의 입력 DNA에 대해 권장되는 어댑터 양을 나열합니다.

표 2. 100 pg-1 μg 입력 DNA에 권장되는 어댑터 양

【 참고 】： 어댑터 수량 위 표의 요구 사항에 따라 조정될 수 있습니다.