설명
T4 폴리뉴클레오타이드 키나제(T4 PNK)는 5'-하이드록실 키나제로서, ATP에서 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드 사슬(이중 가닥 및 단일 가닥 DNA 또는 RNA 포함)의 5'-하이드록실 말단, 그리고 3'-모노포스페이트 뉴클레오타이드로의 γ-인산의 이동을 촉진합니다. 이 이동은 가역적입니다. T4 PNK는 또한 3'-포스파타제 활성을 가지고 있어 3'-인산화된 올리고뉴클레오타이드 말단, 데옥시 3'-모노포스페이트 뉴클레오타이드, 그리고 데옥시 3'-디포스페이트 뉴클레오타이드를 탈인산화합니다. ADP가 존재할 경우, T4 PNK는 5'-포스파타제로서 작용하여 5'-인산화된 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드의 5'-인산기와 ATP의 교환을 촉진합니다. 이 효소는 DNA 라이브러리 구축 및 프로브 생성을 위한 말단 표지에 널리 사용됩니다.
응용 프로그램
후속 연결을 위한 DNA 또는 RNA의 5' 말단 인산화
프로브 및 시퀀싱 목적으로 DNA 또는 RNA의 말단 라벨링
DNA 또는 RNA의 3' 말단에 부착하기 위한 pNp 기질을 제조하기 위해 인산화된 3' 말단을 갖는 모노뉴클레오티드의 5' 인산화
3' 인산기를 갖는 올리고뉴클레오티드의 5' 말단에 라벨링
명세서
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원천 |
박테리오파지 T4 |
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분자량 |
36.78kDa |
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집중 |
10 U/μL |
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단위 정의 |
1단위는 37°C에서 30분 이내에 1nmol의 [γ-32P] ATP를 반응에 통합하는 데 필요한 양으로 정의됩니다. |
구성 요소
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구성품 번호 |
이름 |
12902ES76 |
12902ES86 |
12902ES92 |
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12902-A |
T4 폴리뉴클레오티드 키나제(10 U/μL) |
50 μL |
250 μL |
1mL |
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12902-B |
10×T4 PNK 버퍼 |
500 μL |
1mL |
2×1mL |
[참고]: 10×T4 PNK 완충액에는 ATP가 포함되어 있지 않습니다. 고객은 최종 농도를 1 mM로 하여 직접 ATP를 첨가하거나 T4 DNA 리가제 완충액을 사용해야 합니다.
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