CRISPR/Cas9는 RNA를 통해 Cas 뉴클레아제가 표적 유전자에 특정 DNA 변형을 가하는 기술로, 박테리아와 고세균이 파지와 외부 플라스미드의 공격에 대응하여 진화시킨 후천성 면역 방어 기전입니다. 이 시스템에서 Cas9 뉴클레아제는 인공적으로 최적화된 단일 가이드 RNA(sgRNA)의 안내를 받아 표적 부위에서 이중 가닥 DNA(dsDNA)를 절단하여 DNA 손상을 유발합니다. DNA는 생체 내에서 비상동성 말단 접합 또는 상동성 유도 복구 기전을 통해 복구되며, 프레임시프트 돌연변이, 유전자 치환 또는 결실을 초래합니다.

Hifair™ 정밀 sgRNA 합성 키트는 T7 RNA 중합효소 혼합물을 사용하여 spCas9 sgRNA를 효율적으로 전사합니다. 이 키트는 Cas9 단백질이 인식하고 스캐폴드 역할을 하는 특정 서열을 포함합니다. 이 서열의 일부는 사용자가 설계한 표적 특이 서열과 부분적으로 겹칠 수 있습니다. 상보적인 가닥은 DNA 중합효소에 의해 채워져 전사를 위한 dsDNA 주형을 생성합니다. 제공된 시약과 사용자가 설계한 특정 DNA 서열을 사용하여, 이 키트는 단일 튜브 반응으로 4시간 이내에 20~100μg의 기능성 sgRNA를 얻을 수 있습니다.

특징

높은 합성 수율 – 단 4시간 만에 단일 튜브 반응으로 20~100µg의 sgRNA를 합성합니다.

폭넓은 적용성 – 다양한 sgRNA 시퀀스와 타겟 유형에서 지속적으로 높은 수율을 보입니다.

뛰어난 순도 – 뚜렷한 단일 밴드를 가진 sgRNA를 생산하여 부산물을 최소화합니다.

검증된 기능적 활동 – 합성된 sgRNA는 Cas9를 매개로 한 DNA 절단을 효율적으로 안내합니다.

응용 프로그램

• CRISPR/Cas9 게놈 편집
• 시험관 내 절단 검정;
• 기능 유전체학 연구
• 유전자 치료 연구

구성 요소

배송 및 보관

본 제품은 -25 ~ -15 ^o C 에서 2 년간 보관하시기 바랍니다 .

수치

1. 높은 합성 수율

그림 1. 다양한 반응 시간에 따른 sgRNA 수율. HifairTM Precision sgRNA Synthesis Kit를 사용하면 단일 튜브 반응으로 4시간 이내에 20~100µg의 sgRNA를 생산할 수 있어 유전체 편집 응용 분야의 요구 사항을 완벽하게 충족합니다.

2. 광범위한 호환성 – 다양한 sgRNA 유형에서 높은 수율을 달성합니다.

그림 2. 다양한 sgRNA 유형의 합성 수율. HifairTM Precision sgRNA Synthesis Kit를 사용하여 10가지 sgRNA를 병렬로 합성했습니다. 결과는 이 키트가 여러 sgRNA 유형에 걸쳐 높은 수율을 일관되게 제공하여 다양한 유전자 편집 응용 분야의 요구를 충족함을 보여줍니다.

3. 높은 순도 – 합성된 sgRNA는 최소한의 불순물로 단일하고 뚜렷한 밴드를 보입니다.

그림 3. 합성된 sgRNA의 품질 평가(Agilent 2100). HifairTM Precision sgRNA Synthesis Kit를 사용하여 합성된 sgRNA를 Agilent 2100 시스템에서 분석했습니다. 분석 결과, 2차 피크 없이 뚜렷한 단일 피크가 나타나 고순도를 나타냈습니다.

4. 높은 활동성 – Cas9 뉴클레아제가 높은 효율로 표적 DNA를 절단하도록 효과적으로 안내합니다.

그림 4. 합성된 sgRNA의 절단 효율. HifairTM Precision sgRNA Synthesis Kit를 사용하여 합성된 sgRNA를 Cas9 뉴클레아제와 결합하여 표적 DNA의 시험관 내 절단을 수행했습니다. 아가로스 겔 전기영동 결과, 합성된 sgRNA가 Cas9의 특정 표적 부위 절단을 효과적으로 유도하여 예상 크기의 DNA 단편을 생성함을 확인했습니다.

서류:      

안전 데이터 시트

1 1355 _MSDS_ 버전 EN202 50625 .pdf

매뉴얼

1 1355 _Manual_Ver.EN 20240710 .pdf