Hifair ^™ Advanced One Step RT-qPCR Kit는 SYBR Green I 염료를 기반으로 하는 형광 정량 키트입니다. 유전자 특이적 프라이머를 사용하여 역전사 반응과 qPCR 반응이 하나의 튜브에서 완료되므로 캡을 반복적으로 열고 피펫팅할 필요가 없어 분석 효율이 크게 향상되고 오염 위험이 줄어듭니다. RNA 샘플의 경우, 효율적인 cDNA 합성을 위해 내열성 Hifair ^™ V 역전사효소를, 정량 증폭을 위해 UNICON ^™ HotStart Taq DNA Polymerase를 사용합니다. 최적화된 완충액 시스템에서, 키트의 감도는 고발현 표적의 경우 최대 0.1 pg, 저발현 표적의 경우 최대 1 pg이며, DNA 샘플의 증폭 및 정량에도 적합합니다. 본 키트는 DNA 샘플의 증폭 및 정량에 적합하며, 다양한 식물 및 동물 샘플, 세포 및 미생물의 핵산을 민감하게 검출하고 정량할 수 있습니다.

명세서

구성 요소

저장

본 제품은 -25~-15℃에 보관하시기 바랍니다. 빛으로부터 멀리 1년.

지침

1. 반응 체계 구성*****

* Low Rox 모델과 Rox 보정이 없는 모델은 위 반응 시스템에 따라 직접 제조합니다. High Rox 모델을 사용하는 경우, Hieff™ SP High Rox를 2 x Hifair™ Advanced SG Buffer에 1:250 v/v로 첨가하고 잘 혼합한 후 원심분리합니다. Hieff™ SP High Rox가 포함된 2 x Hifair ^™ Advanced SG Buffer는 Low Rox 및 No Rox 보정 모델 사용에 영향을 미치지 않습니다.

** 최종 프라이머 농도는 0.2 μmol/L이었으며, 필요에 따라 0.1~1 μmol/L 사이로 조절될 수 있었습니다.

*** 이 시약은 매우 민감하여 총 RNA 범위가 1 pg-1 μg이고, 인체 샘플 테스트 결과 최적의 입력은 1 pg-100 ng으로 나타났으며, 적절한 경우 전체 Ct 값을 15-30 범위로 조절했습니다.

**** 타겟 유전자 증폭의 유효성과 재현성을 보장하기 위해 20 μL 또는 50 μL를 사용하는 것이 좋습니다.

***** 초청정 실험대에서 준비하고 뉴클레아제 잔류물이 없는 팁과 반응 튜브를 사용하세요. 필터 카트리지가 있는 팁을 사용하는 것이 좋습니다. 교차 오염 및 에어로졸 오염을 방지하세요.

2) 반응 프로그램

*역전사 반응 온도는 실험 필요에 따라 50~55°C 사이에서 선택할 수 있습니다. DNA 샘플의 경우, 역전사 과정을 생략할 수 있습니다.

** 특별한 경우 프라이머 Tm 값에 따라 어닐링/신장 온도를 조절할 수 있으며, 60°C가 권장됩니다.

3) 적용 모델

Rox 교정이 필요하지 않은 계측기 모델:

바이오라드: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, 미니옵티콘, 옵티콘, 옵티콘 2, 크로모4;

에펜도르프: 마스터사이클러 ep 리얼플렉스, 리얼플렉스 2s;

퀴아젠: 코벳 로터진 Q, 로터진 3000, 로터진 6000;

로슈 응용과학: LightCycler 480, LightCycler2.0, Lightcycler 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Low Rox 적용 모델:

ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 및 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

스트라타진 MX3000P, MX3005P, MX4000P;

High Rox 적용 모델*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT 패스트, 스텝원, 스텝원 플러스.

* High Rox 모델의 경우 Hieff™ SP High Rox는 2 x Hifair ^™ 에 비례하여 추가해야 합니다. 사용 전 고급 SG 버퍼를 사용하세요.

노트

1. 본 제품은 연구용으로만 사용됩니다.
2. 안전을 위해 실험실 가운과 일회용 장갑을 착용해 주시기 바랍니다.

서류:

안전 데이터 시트

11175ES_MSDS_HB250721.pdf​

매뉴얼