Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)은 Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)의 업그레이드 버전입니다. 이전 세대 Hifair™ Ⅲ Reverse Transcriptase와 비교하여, 본 제품은 저해제 내성이 강화되고 역전사 속도가 빨라지며 cDNA 수율이 높아져 동물, 식물 및 미생물 RNA의 역전사 반응에 적합합니다 . 본 제품에 포함된 gDNA Digester Mix-V2는 잔류 DNA 제거 능력이 크게 향상되어 최대 1000ng의 DNA를 효과적으로 분해하고, RNA 템플릿의 DNA 오염을 제거하여 더욱 신뢰할 수 있는 결과를 보장합니다.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix는 역전사 반응에 필요한 모든 성분을 함유하고 있습니다. RNA 주형과 RNase-free H2O만 첨가하면 반응이 시작되고, 동시에 gDNA Digester의 활성이 종료되어 cDNA의 무결성이 유지됩니다.

역전사 제품은 염료 기반 및 프로브 기반 qPCR에 적합합니다. 그러나 유전자 클로닝과 같은 긴 단편 증폭에는 권장되지 않습니다. 이러한 용도에서는 고효율 역전사를 위해 Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(제품 번호 11150ES)를 권장합니다. 

특징

• 빠르고 간편함 – 단 5분 만에 역전사를 완료하고, 전체 워크플로 시간은 7분 5초입니다.
• 높은 효율성 – 더 높은 cDNA 수율과 더 낮은 Ct 값을 달성하여 더욱 신뢰할 수 있는 결과를 제공합니다.
• 높은 감도 – 최소 10 pg의 RNA 양까지 감지합니다.
• 강력한 성능 – 분해된 RNA나 억제제가 포함된 샘플에서도 높은 수율을 유지합니다.
• 향상된 DNA 분해 – 더 많은 잔류 DNA를 효과적으로 제거하여 다운스트림 애플리케이션을 더욱 깨끗하게 만듭니다.
• 안정성 및 신뢰성 – cDNA는 실온에서 7일 동안 안정을 유지하며, 시약은 성능 저하 없이 최대 30회의 동결-해동 주기를 견딥니다.

구성 요소

저장

본 제품은 -25~ -15℃에서 1년간 보관하시기 바랍니다 .

애플리케이션

RNA 검출

수치

1. 워크플로: 빠르고 간단 함

그림 1. 워크플로우 비교: 11155ES는 단 5분(총 시간 약 7분) 만에 역전사를 완료합니다. 이는 일반 시약(약 17분)보다 훨씬 빠릅니다.

2. 고효율 합성 – 다양한 표적 및 종에 걸쳐 우수한 cDNA 수율

그림 2. 역전사 효율 비교

다양한 출처의 RNA를 사용하여, 각기 다른 역전사 시약을 사용하여 각각의 프로토콜에 따라 cDNA 합성을 수행했습니다. 염료 기반 qPCR 분석 결과, 11155ES는 다른 시약보다 일관되게 높은 cDNA 수율과 낮은 Ct 값을 생성했으며, 이는 ∆Ct 값에서도 확인할 수 있습니다.

3. 높은 감도 – 최소 10 pg의 RNA도 감지

그림 3. 역전사 민감도 비교

인간 293T 세포와 애기장대(Arabidopsis thaliana)의 RNA를 다양한 투입량으로 연속 희석했습니다. 프로토콜에 따라 다양한 역전사 시약을 사용하여 cDNA 합성을 수행한 후, Yeasen 염색 기반 qPCR 시약을 사용하여 qPCR을 수행했습니다. ∆Ct [Ct (기타 시약) - Ct (11155ES)] 값은 다른 역전사 시약과 비교하여 11155ES가 다양한 RNA 투입량에서 일관되게 더 우수한 성능을 제공함을 나타냅니다.

4. 향상된 gDNA 제거 – 더 효과적인 잔류 DNA 소화

그림 4. gDNA 소화/제거 능력 비교

인간 293T 세포의 게놈 DNA(1000 ng)를 주형으로 사용했습니다. 다양한 역전사 시약을 각각의 프로토콜에 따라 시험했으며, gDNA 분해 없이 병렬 그룹을 구성했습니다. 역전사 후 Yeasen 11185ES를 사용하여 qPCR을 수행했습니다. 결과는 이 시약이 잔류 gDNA를 효과적으로 분해하여 제거함을 보여줍니다.

5. 강력한 안정성

그림 5. 안정성 시험

(A) 반복적인 동결-해동 사이클 후의 성능. 역전사 시약을 사용하여 0, 10, 20 또는 30회의 동결-해동 사이클을 수행한 후, 염료 기반 qPCR을 수행하여 역전사 분석을 수행했습니다. 10~30회의 동결-해동 사이클을 수행한 샘플의 Cт 값은 대조군(0회 사이클)과 비교하여 최소 변동을 보였으며, 그 차이는 0.5 Cт 이하였습니다.

(B) 다양한 보관 조건에서의 안정성. 합성된 cDNA의 안정성은 다양한 조건에서 보관한 후 평가되었습니다. 제품 11155ES로 생성된 cDNA는 Yeasen 염료 기반 qPCR 마스터 믹스를 사용하여 qPCR을 수행하기 전에 각각 -80°C, -20°C, 4°C, 25°C, 37°C에서 1~7일 동안 보관했습니다. 데이터는 -80°C가 아닌 조건에서 보관한 샘플에서 얻은 Cт 값이 -80°C에서 보관한 샘플과 매우 일치하며, 0.5 Cт 이하의 차이를 보였습니다.

노트

1. 본 제품은 연구용으로만 사용됩니다.

2. 안전을 위해 실험실 가운과 일회용 장갑을 착용하고 작업해 주시기 바랍니다.

3. 샘플의 무결성을 유지하기 위해 모든 피펫팅 및 혼합 단계를 얼음 위에서 수행하세요.

4. 사용하기 전에 각 성분을 조심스럽게 뒤집어 저속으로 원심분리하여 적절히 혼합되도록 합니다.

문서:

안전 데이터 시트

11155_MSDS_HB250811_KO.PDF

매뉴얼

11155_매뉴얼_버전 EN20250211.pdf

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