LZCap™AG(3'Ma-Cy7)는 Cy7 형광 마커를 갖는 Cap1 유사체로, mRNA 동시 전사 캡핑 시약으로 사용할 수 있습니다. T7 중합효소의 작용 하에 LZCap®AG(3'Ma-Cy7)는 NTP와 주형 DNA를 동시 전사하여 5' 말단 Cap1 구조를 갖는 mRNA를 생성합니다. 캡핑된 mRNA는 세포 및 생체 내에서 직접 번역 및 발현될 수 있으며, 발현 효율이 우수합니다. LZCap®AG(3'Ma-Cy7)로 캡핑된 mRNA는 유세포 분석과 형광 현미경을 통해 Cy7 형광을 검출할 수 있으며, mRNA와 LNP의 분포를 추적하고 위치를 파악할 수 있습니다. LZCap®AG(3'Ma-Cy7) mRNA의 권장 Cy7 형광 파장은 (651/780)입니다.

명세서

구성 요소

저장

본 제품은 -25~-15℃에서 2년간 보관하시기 바랍니다.

지침

LZCap™의 DNA 템플릿 디자인

LZCap™AG(3'Ma-Cy7)는 AG로 시작하는 서열에 적합합니다. T7 프로모터(밑줄) 뒤에 AG 서열이 오면 전사가 효과적으로 시작됩니다.

작동 지침

1. 실험에 필요한 구성품을 얼음 위에 놓고 해동합니다.

2. 다음 반응 시스템에 따라 실온에서 전사 시스템을 준비합니다.

【참고】 : *야생형 UTP 대신 변형된 N-Me-pUTP를 사용할 수 있습니다. 변형된 N-Me-pUTP는 mRNA의 면역원성을 감소시킵니다. 3. 준비된 반응 용액을 혼합하고, 잠시 원심분리한 후 37°C에서 2~3시간 동안 배양합니다. 전사체 길이가 100nt 미만인 경우, 반응 시간을 4~8시간으로 늘립니다.

3. 준비된 반응 용액을 혼합하고, 잠시 원심분리한 후 37°C에서 2~3시간 동안 반응시킨다. 전사체 길이가 100nt 미만이면 반응 시간을 4~8시간으로 늘린다.

참고사항:

1) LZCap™AG (3'Ma-Cy7)는 5'AG 3' 시작 서열을 갖는 T7 프로모터 전사 벡터에 적합하며, 이는 벡터를 구성할 때 고려해야 할 사항입니다.

2) LZCap™AG (3'Ma-Cy7) 및 mRNA 생성물은 빛을 피해 보관하고 사용해야 합니다.

3) 실험에 사용된 시약, 소모품, 용기는 RNase 오염이 없습니다.

4) 전사에는 선형화된 DNA 템플릿을 사용하는 것이 좋습니다.

5) 야생형 뉴클레오티드 대신 변형된 뉴클레오티드를 사용하는 경우, 반응의 최종 농도는 변하지 않습니다.

6) PCR 산물을 전사 개시 템플릿으로 사용하면 DNA 템플릿의 양을 절반으로 줄일 수 있습니다.

7) 10×전사 완충액의 농도가 높기 때문에 고염 환경에서는 중합효소가 불활성화됩니다. 동시에 완충액에는 주형 DNA와 침전물을 형성하는 성분이 포함되어 있습니다. 반응 용액을 제조할 때 성분 첨가 순서를 조정하고 시스템을 계산해야 합니다. 먼저 물을 첨가하고, 그 다음 완충액, NTP를 첨가하고, 마지막으로 주형과 효소를 첨가하여 고농도의 10×염 이온이 효소에 영향을 미치지 않도록 합니다.

8) 전사 후 mRNA 정제 시, mRNA 침전물을 미리 냉각된 75% 에탄올로 한 번 세척합니다. 반복 세척하면 형광단에 영향을 미칩니다.

서류:

안전 데이터 시트

10689_MSDS_HB250613.pdf

매뉴얼

10689_매뉴얼_버전 EN20250613.pdf