Hieff™ T7 RNA 중합효소(저 dsRNA, 250 U/μL)_ 10628ES
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Hieff™ T7 RNA 중합효소(저 dsRNA, 250 U/μL)_ 10628ES

Yeasen제품번호: 10628ES10
크기: 10 쿠
가격:
$180.00

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재고:
재고 있음
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설명

이 변이체는 야생형 T7 RNA 중합효소에서 유래하여 대장균에서 생산된, 공학적으로 조작된 T7 RNA 중합효소 변이체(저 dsRNA)입니다. 캡 유사체를 효율적으로 결합시키면서 이중가닥 RNA(dsRNA) 생성을 현저히 감소시키고, 야생형 T7 RNA 중합효소와 유사한 고효율의 시험관내 전사(IVT)를 나타냅니다. T7 프로모터 서열(5'-TAATACGACTCACTATAG*-3')로부터 이중가닥 DNA의 5'→3' RNA 합성을 촉매하며, NTP를 기질로 사용합니다.

참고: G*는 RNA 전사본의 첫 번째 염기입니다.

이 제품의 원래 브랜드 이름은 CleaScrip™입니다.

특징

  • dsRNA 함량 감소: dsRNA 함량이 10배 이상 감소했습니다.
  • 높은 수율: 9 mg/mL 이상의 안정적인 수율.
  • 낮은 캡 아날로그 입력**: 캡 아날로그 입력을 2.5mM로 줄일 수 있습니다.
  • 높은 캐핑 효율성**: 캐핑 효율성이 99%를 초과합니다.

이 효소의 개발에 대한 정보를 찾아보세요.

구성 요소

구성품 번호

이름

10628ES10

10628ES60

10628ES72

10628ES86

 

 

(10쿠)

(100쿠)

(250쿠)

(2,500 KU)

10628

Hieff T7 RNA 중합효소(저 dsRNA, 250 U/μL)

40 μL

400 μL

1mL

10mL

명세서

원천

재조합 T7 RNA 중합효소 유전자를 가진 대장균

최적 온도

37도

저장 버퍼

50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100, 50% (v/v) 글리세린, 25℃에서 pH 7.9

단위 정의

37°C, pH 8.0에서 1시간 이내에 산불용성 침전물 내 [ 3 H] GMP 1nmol을 통합하는 데 필요한 효소의 양을 1단위로 정의합니다.

추천 Mg2+

30mM 아세트산 마그네슘

품질관리 기준

나는 항목

사양/표준

효소 활동

250 - 300U/μL

단백질 순도

≥95%

내독소

<20 EU/mg

프로테아제

부정적인

엑소뉴클레아제

부정적인

니카제

부정적인

RNase

부정적인

대장균 숙주 단백질

<50ppm

대장균 숙주 DNA

<10fg/U

마이코플라스마 검사

부정적인

관련 상품

Tris NTP는 dsRNA를 시너지적으로 감소시킵니다.

수치

1. 8K 시퀀스 검증 – WT-T7 대 T7(저 dsRNA)

T7 RNA 중합효소

수율(mg/mL)

mRNA 무결성(%)

dsRNA 함량(%)

WT T7

9.5

81.9

0.29%

낮은 dsRNA T7

9.0

82

0.0037%

2. 캡핑 효율 및 세포 기능 검증:
4K 및 1K 단편 모두에 대해 캡 유사체 투입량에 따른 캡핑 효율을 평가한 결과, 48시간 후 캡핑 효율이나 세포 기능에 유의미한 차이 없이 투입량을 2.5 mM까지 낮출 수 있음을 보였다. T7 돌연변이체와 야생형(WT) 효소 간에는 유의미한 차이가 관찰되지 않았다.
고객 피드백:
그림 1. T7 RNA 중합효소 돌연변이체 검사. dsRNA 함량: dsRNA 함량이 10배 이상 감소함(A). mRNA 무결성: 90% 이상 유지됨(B). 2K 단편 캡핑 효율: 99% 초과(C, D). 높은 무결성(E)
이자형
그림 1. T7 RNA 중합효소 돌연변이체 검사. dsRNA 함량: dsRNA 함량이 10배 이상 감소함(A). mRNA 무결성: 90% 이상 유지됨(B). 2K 단편 캡핑 효율: 99% 초과(C, D). 높은 무결성(E)
그림 1. T7 RNA 중합효소 돌연변이체 검사. dsRNA 함량: dsRNA 함량이 10배 이상 감소함(A). mRNA 무결성: 90% 이상 유지됨(B). 2K 단편 캡핑 효율: 99% 초과(C, D). 높은 무결성(E)


표 1. 낮은 dsRNA T7 RNA 중합효소의 수율은 WT의 수율과 비슷합니다.

그림 2. 쥐 RAW264.7 세포에서 IVT 생성물의 면역원성 평가(그림 2A 및 2B). 돌연변이체에서 생성된 mRNA를 형질감염시킨 RAW264.7 세포에서 IFN-β mRNA 및 단백질 수치는 야생형에 비해 감소하였다. 이는 야생형 T7 RNAP에서 합성된 mRNA가 가장 강력한 면역 반응을 유도한 반면, 돌연변이체에서 생성된 mRNA는 유의미하게 감소된 반응을 보였음을 시사한다.

그림 2. 쥐 RAW264.7 세포에서 IVT 생성물의 면역원성 평가(그림 2A 및 2B). 돌연변이체에서 생성된 mRNA를 형질감염시킨 RAW264.7 세포에서 IFN-β mRNA 및 단백질 수치는 야생형에 비해 감소하였다. 이는 야생형 T7 RNAP에서 합성된 mRNA가 가장 강력한 면역 반응을 유도한 반면, 돌연변이체에서 생성된 mRNA는 유의미하게 감소된 반응을 보였음을 시사한다.

그림 3. 셀룰로스 처리 후 Hieff™ T7 RNA 중합효소로 합성된 mRNA의 dsRNA 함량은 야생형 효소로 합성된 mRNA의 dsRNA 함량보다 낮습니다.

그림 3. 셀룰로스 처리 후 Hieff™ T7 RNA 중합효소로 합성된 mRNA의 dsRNA 함량은 야생형 효소로 합성된 mRNA의 dsRNA 함량보다 낮습니다.

배송 및 보관

제품은 드라이아이스와 함께 배송되며 -15℃ ~ -25℃에서 1년간 보관이 가능합니다.

출판:

엔지니어링된 T7 RNA 중합효소는 말단 전이효소 및 RNA 의존성 RNA 중합효소 활동을 낮춰 dsRNA 형성을 줄입니다. FEBS 저널 2025년 3월 3일

FADS 및 준합리적 설계 변형 T7 RNA 중합효소는 dsRNA 생성을 감소시켰으며, 말단 전이효소 및 RDRP 활성이 낮았습니다(bioxRxiv, 2024년 5월 31일).


서류

안전 데이터 시트

10628_MSDS_HB250724.pdf

매뉴얼

10628_매뉴얼_버전 EN20250724.pdf

관련 블로그：

Hieff™ Low dsRNA T7 RNA 중합효소 돌연변이체, mRNA 백신 및 치료제 개발에 기여


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    이 제품은 연구 목적으로만 사용되며 인간이나 동물의 치료 또는 진단용으로 의도되지 않았습니다. 제품과 콘텐츠는 Yeasen Biotechnology가 소유한 특허, 상표 및 저작권으로 보호됩니다. 상표 기호는 모든 지역에서 반드시 등록되는 것은 아니지만 원산지를 나타냅니다.

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