2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix(염료 포함)는 Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase, dNTP 및 최적화된 완충액 시스템을 포함하는 바로 사용 가능한 2× 사전 혼합 용액으로, 사전 추가된 전기영동 지시약이 포함되어 있습니다. 사전 혼합액에는 사전 추가된 전기영동 지시약이 포함되어 있으며, PCR 산물은 직접 전기영동할 수 있고, 증폭 산물은 평평한 끝입니다. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix(염료 포함)는 빠르고 쉽고, 민감도가 높고, 특이성이 높고, 안정성이 우수하다는 장점이 있으며, 반응 시스템은 프라이머와 템플릿만 있으면 추가할 수 있습니다. 또한, 이 제품에는 특정 보호제도 포함되어 있어, 사전 혼합액은 반복적인 동결 및 해동 후에도 안정적인 활성을 유지할 수 있습니다.
매우 높은 충실도 : 돌연변이가 일어나기 쉬운 높은 GC 유전자의 낮은 불일치율
빠른 속도: 속도는 빠르다 5초/kb;
폭넓은 적용성: 20-80% GC 함량의 유전자를 증폭하는 데 사용할 수 있으며 20%의 혈액과 마우스 용해물을 견딜 수 있습니다.
좋은 안정성: 37°C에서 7일간 보관해도 성능에 영향이 없습니다.
간편한 사용: 증폭을 위해 프라이머와 템플릿만 추가하고, 직접 전기영동을 위해 청색 로딩 염료를 사용합니다.
명세서
| 제품번호 | 10164ES01 | 10164ES03 | 10164ES08 |
| 크기 | 250 μL | 1ml(1ml) | 5×1ml |
그림
그림: Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase는 다른 브랜드의 제품(A)에 비해 높은 충실도를 가지고 있습니다. 이 분석은 다양한 종의 게놈에서 증폭된 6개의 GC가 풍부한(약 80%) 세그먼트의 PCR 생성물의 돌연변이 빈도를 조사하여 수행되었습니다. Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase에 의해 증폭된 PCR 생성물은 벡터에 클로닝되었고, 각 시퀀스에 대해 선택된 100개의 단일 클론은 Sanger 시퀀싱을 거쳤습니다.
Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase는 높은 증폭 속도(B), 높은 GC 증폭 호환성(C), 혈액 내성(D)을 가지고 있습니다. 고객의 PCR 및 시퀀싱 결과에 따르면 Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase는 PCR 수율과 특이성(EH)에서 좋은 성능을 보입니다.
저장
본 제품은 -25~-15℃에서 1년간 보관하시기 바랍니다.
지침
- 추천하는 PCR 반응 시스템.
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구성 요소 |
용량（μL） |
최종 농도 |
|
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR 마스터 믹스(염료 포함)* |
25 |
1× |
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주형** |
엑스 |
- |
|
전방 프라이머(10 μmol/L)*** |
2 |
0.4 μmol/L |
|
역 프라이머(10 μmol/L) |
2 |
0.4 μmol/L |
|
디디에이치 2 오 |
최대 50개 |
- |
표 1 PCR 반응 시스템
*2 mM Mg2+와 200 μM dNTP를 함유한 1× 프리믹스.
**권장 범위는 10~200 ng, cDNA 샘플 업로드 용량 범위는 반응 시스템의 1/10을 넘지 않아야 하며, 권장 용량은 1~2.5 μL입니다.
***PCR 반응 시스템의 최종 프라이머 농도는 0.2-1 μM이며, 0.4 μM이 권장됩니다.
- 반응 프로그램.
|
사이클 단계 |
온도 |
시간 |
사이클 |
|
초기 변성 |
98℃ |
30초 |
1 |
|
변성 |
98℃ |
10초 |
30~35세 |
|
가열 냉각* |
60℃ |
5초 |
|
|
확대** |
72℃ |
5-10초/kb |
|
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최종 연장 |
72℃ |
2분 |
1 |
표 2 PCR 반응 프로그램
*권장 온도: 60°C, 프라이머 어닐링에 최적의 온도를 찾기 위해 온도 구배를 설정할 수 있습니다. 권장 어닐링 시간은 5초로 설정되어 있으며 5-30초 사이에서 조정할 수 있습니다. 어닐링 시간이 너무 길면 젤에 확산 증폭 산물이 생길 수 있습니다.
**연장 시간: 권장 5초/kb, 필요에 따라 10초/kb까지 연장 가능.
노트
- 이 제품은 연구 목적으로만 사용됩니다.
- 안전을 위해 실험실 가운과 일회용 장갑을 착용해 주시기 바랍니다.
서류:
10164ES-버전 20230720.pdf
인용 및 참조:
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Storage
FAQ
(2) If the RNA sample is small or if you need to obtain a very long target fragment, it is recommended not to perform digestion during reverse transcription. The longer the target fragment, the more RNA needs to be input, and accordingly, more cDNA will be required.
(2) For animal genomes, after product performance testing, the minimum detectable amount is 100pg of animal genome.
(3) For plasmids, since they are relatively pure, after product performance testing, the minimum detectable amount is 1pg of plasmid.
(1)The thawing requirements for 10166ES stipulate that it should be thawed slowly on ice, and it cannot be thawed at room temperature or through heating.
(2) When performing the amplification process, it is recommended to set the temperature at 68℃ and the amplification speed at 10 seconds per kilobase.
(3) The longer the target fragment to be amplified is, the more template should be used.
(4) In the PCR system, the concentration of primers is too low or the number of cycles is insufficient: appropriately increase the amount of primers, or increase the number of amplification cycles;
Citations
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