배양 중 THP-1 세포 접착 문제 해결

THP-1 세포는 현탁 배양되는 인간 단핵구 백혈병 세포주입니다. 이 세포는 단핵구-대식세포 분화를 모델링하는 데 널리 사용됩니다. 경우에 따라, 일상적인 배양 과정에서 소량이 플라스크 표면에 부착될 수 있는데, 이는 정상적인 현상 입니다 .

그림 1. 정상적인 성장 형태를 보이는 세포의 현미경 사진

약간의 접착력(<20%)
플라스크를 가볍게 흔들면 일반적으로 이러한 세포들이 재현탁됩니다. 계대배양 시에는 현탁 세포만 옮기고 부착된 세포는 그대로 두지 마십시오 . 장시간 정치 배양으로 인해 세포가 가라앉으면 약간의 부착이 발생하는 경우가 많습니다.

과도한 접착(>20%) 또는 단단히 접착된 세포

배양 용기가 접착성이 낮은 처리되지 않은 플라스틱 으로 만들어졌는지 확인하여 접착을 방지합니다.

통과 횟수를 확인하세요. 고통과 THP1 계통은 표현형이 다를 수 있으므로 폐기하고 낮은 통과 횟수의 바이알에서 교체해야 합니다.

배양 조건을 검토하세요:

배지: RPMI1640 + 10% FBS + 페니실린/스트렙토마이신 + 0.05 mM 2-머캅토에탄올

인큐베이터: 37 °C , 5% CO2 (즉, 95% 공기 / 5% CO2)

일반적인 유지 관리 팁

세포 밀도를 3–7 × 10⁵ cells/mL , 이상적으로는 ~5 × 10⁵/mL 로 유지합니다.

새로 고칠 때 조건화된(사용된) 배지를 1~2mL 남겨 두면 성장이 향상됩니다.

응집 현상은 혈청 품질이나 농도를 최적화(최대 20%)하면 완화될 수 있습니다.

THP1 세포의 형질 전환을 수행하는 경우 (예: siRNA 또는 miRNA 사용), Yeasen은 THP1과 같은 현탁 세포주에 최적화된 시약을 제공합니다.

Hieff Trans™ 시험관 내 siRNA/miRNA 형질감염 시약(Cat No. 40806ES)
혈청 적합 조건에서 THP1과 같은 현탁 세포주에서 최대 ~80%의 침묵 효율을 뒷받침하는 비리포좀 PEI 기반 시약입니다.

문제	제안된 조치
약간의 접착력(<20%)	플라스크를 흔든다; 계대배양 시 현탁 세포만 옮긴다.
과도한 접착력	저부착 플라스크를 사용하고, 통과 횟수를 확인하고, 배지/첨가제를 검토하세요.
문화 조건	RPMI1640 + 10% FBS + PS + 0.05 mM 2머캅토에탄올; 37 °C, 5% CO₂
세포 밀도	3–7 × 10⁵ 세포/mL 유지; 배양 시 조건배지 사용
형질전환 시약	Yeasen Hieff Trans 시약(Cat. No. 40805ES 또는 40806ES)을 사용하세요.

제품명	사양	카탈로그 번호
Hieff Trans™ 시험관 내 siRNA/miRNA 형질전환 시약	0.5mL/1mL	40806 ES0 2 / 03

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