説明
RCA (E1A) コピー数検出キットは、アデノウイルスベクターの使用に関連してさまざまな細胞治療製品および遺伝子治療製品に発生する可能性のある複製能アデノウイルス (RCA) の潜在的リスクを定量的に分析および検出するために使用できます。また、HEK293 および HEK293T 細胞由来のリスク遺伝子 E1A 残留 DNA など、宿主細胞由来の生物製剤におけるリスク遺伝子 E1A の残留 DNA の存在を定量的に分析および検出するためにも使用できます。
本キットは、アデノウイルス上のE1A遺伝子配列に特異的なプライマーを設計し、プローブ法による蛍光定量PCRの原理を採用することで、複製型アデノウイルスRCAのリスクと宿主細胞由来のE1A残留DNAを迅速かつ特異的に検出します。定量限界は4.1コピー/μLと極めて低く、RCA（E1A）DNAコントロール（DNA定量参照製品）が含まれています。本キットは、残留DNAサンプル調製キット（カタログ番号1846 1 ES）と併用する必要があります。
特徴
- 規制への準拠:製品は Chp、USP、ICH などの要件に従って完全に検証されており、その性能は中国および海外の規制と標準に準拠しています。
- 品質保証：キットの原材料はすべて自社開発しており、qPCR ミックスおよびその他の酵素製品は超クリーンな酵素工場で生産されています。
- 高感度：定量下限値（LLOQ）は4.1コピー/uL でした。
- 高精度:バッチ内再現性が高く CV <10%、バッチ間変動が小さい、つまり中程度の精度 CV <15%。
- 強力な特異性：他の外因性ゲノム DNA からの干渉を受けずにRCA（E1A）残留 DNAを特異的に検出します。
- 強力な耐干渉性：内部品質管理（IC）を導入することで、サンプルの干渉、異常な反応準備などの要因を排除し、偽陰性を効果的に回避できます。
応用
- 生物学的製剤中の残留RCA（E1A）DNA検査。
仕様
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感度 |
4.1コピー/μL （範囲1.64×101 ～ 1.64×105コピー/μL ） |
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分析時間 |
約1.5時間 |
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アッセイ原理 |
蛍光プローブqPCR法 |
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必要な楽器 |
リアルタイム蛍光定量PCRシステム |
製品パフォーマンス
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製品性能検証プログラム |
参照標準または要件 |
イェーセン |
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1.キットの基準 |
自家製の標準が利用可能 |
アデノウイルスE1A遺伝子を含むプラスミドDNA |
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2.線形範囲 |
アッセイ範囲 |
実際の状況を参照する |
1.64x101～1.64x105コピー/μL |
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R2 |
≥0.98 |
≥0.99以上 |
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スロープ |
-3.1～-3.8 |
-3.1～-3.6 |
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増幅効率 |
84%～109% |
90%～109% |
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3. 正確性 |
回復率 |
50%～150% |
70%～130%以上 |
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4. 精度 |
再現性 |
CV≤15% |
10%未満 |
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中精度 |
CV≤15% |
15%未満 |
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5. 独占性 |
他のソースからのDNAへの干渉なし |
他の外因性DNAの干渉を受けずにRCA DNAを特異的に検出 |
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6. 感受性 |
定量限界 |
対象物質の最小濃度を確実に定量 |
4.1コピー/μL |
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7. 耐久性 |
試薬の安定性 |
異なる保管温度が試薬の性能に及ぼす影響を評価する |
4℃で14日間、37℃で14日間、凍結融解を10回繰り返した場合、キットの増幅効率は90％～109％、R2≥0.99以上です。 |
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機器の互換性 |
キットはテスト結果に影響を与えることなく、さまざまなデバイスで使用できます。 |
多くの種類の qPCR 機器と互換性があります (例: Bio-Rad CFX96 光学モジュール、Thermo Scientific ABI 7500、ABI Quant Studio 5) |
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コンポーネント
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コンポーネント番号 |
名前 |
41321ES50 |
41321ES60 |
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41321-A |
RCA (E1A) qPCRミックス |
0.75 mL |
1.5mL |
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41321-B |
RCA (E1A) プライマー＆プローブミックス |
200μL |
400μL |
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41321-C |
DNA希釈バッファー |
1.8mL×2 |
1.8mL×4 |
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41321-D |
RCA (E1A) DNAコントロール (1.64×107コピー/μL) |
25μL |
50μL |
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41321-E |
IC * |
50μL |
100μL |
* IC ：内部統制。
ストレージ
この製品は-25～-15℃で2年間保管してください。
41321 -A と41321 -B は両方とも光から保護して保管する必要があります。
数字
- 定量限界
RCA DNAは、それぞれ1.64 ×101コピー/μL、8.2コピー/μL、4.1コピー/μL、2.05コピー/μL、1.64コピー/μLの濃度で検出され、各濃度で10回の反復試験が行われた。その結果、 RCA DNAのCVは4.1コピー/μL以上の濃度で20%未満であることが示された。したがって、 RCA DNA残留物検出キットにおける定量限界は、 RCAの場合4.1コピー/μLであった。
表1 RCA DNAの定量限界（LOQ）アッセイ結果
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繰り返し回数
テスト項目 |
RCA（コピー/μL） |
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量 |
返品率 |
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1 |
3.77 |
91.95% |
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2 |
4.44 |
108.29% |
|
3 |
3.75 |
91.46% |
|
4 |
4.31 |
105.12% |
|
5 |
4.00 |
97.56% |
|
6 |
4.50 |
109.76% |
|
7 |
3.56 |
86.83% |
|
8 |
3.55 |
86.59% |
|
9 |
3.59 |
87.56% |
|
10 |
3.66 |
89.27% |
|
平均値 |
3.91 |
\ |
|
履歴書 |
9.57% |
\ |
図1. 4.1コピー/μL RCA（E1A）DNA qPCRアッセイ結果
文書:
安全データシート
マニュアル
支払いとセキュリティ
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問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
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