説明
マイコプラズマPCR検出キット（Nested PCR）（2G）は、Nested PCR法（Nested PCR）に基づき、様々な生物学的材料（細胞培養物、実験動物の分泌物、動物血清など）中のマイコプラズマ感染を検出します。本キットは定量PCR技術を採用し、マイコプラズマ16S-23S rRNA配列の保存領域に対応する2組のプライマーを設計し、2ラウンドのPCR増幅を実施します。2ラウンド目の増幅産物に基づいてマイコプラズマ汚染を判定します。口腔マイコプラズマ（M.orale）、肺炎マイコプラズマ（M.pneumoniae）、ヒオリニスマイコプラズマ（M.hyorhinis）、アルギニンマイコプラズマ（M.arginini）、ガリセプティカム（M.gallisepticum）、シノビアマイコプラズマ（M.synoviae）、発酵マイコプラズマ（M.fermentans）、クエン酸スピロプラズマ（Spiroplasma citri）、サリバリウム（M.salivarium）など、34種類のマイコプラズマを最大2.5コピー/μLの感度で検出できます。また、10 CFU/mLのマイコプラズマ標準株に対しても正常にバンドを増幅できます。特異性が強く、感度が高く、操作が簡単で迅速という特徴があり、細胞培養上清液の検出にも直接使用できます。
従来のPCRマイコプラズマ検出キットと比較して、本製品はプライマーとテンプレート間の非特異的なペアリングによる非特異的産物の生成を回避でき、またサンプル中の微量のマイコプラズマDNAを高感度に検出して偽陰性を回避できます。
特徴
- 包括的な検出： 高度なネスト PCR テクノロジーにより、1 回の検査で最大 34 種のマイコプラズマを検出できます。
- 例外的な特異性: プライマーは、クロストリジウムやラクトバチルスなどの関連種との交差反応性のない、保存された 16S-23S rRNA 領域をターゲットにします。
- 超高感度: 2.5 コピー/μL という低い検出限界を実現し、早期かつ信頼性の高い識別を実現します。
- 高速で便利なワークフロー:合理化されたプロトコルにより、2 時間以内にサンプルの準備と検出が可能になります。
- 安全 ＆ 汚染なし:付属の非感染性ポジティブコントロールにより安全性が確保され、交差汚染のリスクが排除されます。
仕様
|
用途（機器） |
従来のPCR装置 |
|
サンプルタイプ |
菌株、細胞上清など |
|
ポリメラーゼ |
Taq DNAポリメラーゼ |
|
検出方法 |
ネストPCR |
|
マイコプラズマの種類の検出 |
薬局方でカバーされているマイコプラズマ9種類を含む34種類 |
|
検出限界 |
1回目のPCR：1x103コピー/uL 2回目のPCR：2.5コピー/μL / 5CFU/mL |
|
反応時間（高速PCR手順） |
48分 |
コンポーネント
|
コンポーネント番号 |
名前 |
40614ES10 |
40614ES20 |
|
40614 -A * |
GMyc-1st PCRミックス |
460μL |
460μL×2本 |
|
40614 -B * |
GMyc-2nd PCRミックス |
490μL |
490μL×2本 |
|
40614 -C ** |
陽性コントロールテンプレート |
20μL |
40μL |
【注意】: *PCR反応は非常に感度が高いため、偽陽性を防ぐため、サンプルを加える際は最後に陽性コントロールを加えてください。
**40614-C: ポジティブコントロールテンプレート、ポジティブコントロール。
配送と保管
この製品は-25～-15℃で1年間保管してください。
※キット全体を長期間使用しない場合は、光を避けて保管してください。40614-Cは長期間使用しない場合は、-85～-65℃で冷凍保存できます。
応用
マイコプラズマ汚染；マイコプラズマ検査；細胞培養品質管理
数字
1.ワークフロー
2.特異性
図1. GMyc-PCRマイコプラズマ検出キット（2G）の特異性とマトリックス耐性
(A)/(B) サンプルマトリックスの干渉：14種類の共通サンプルマトリックスと、キットに含まれる陽性コントロール、その添加物（2.5コピー/μL陽性コントロール）、および陰性コントロール（PCRミックス）を検証のために選択した。14種類のマトリックスのいずれにおいてもマイコプラズマは検出されなかった。
(C).検出範囲: GMyc-PCR マイコプラズマ検出キット (2G) は、中国および国際薬局方によって要求される 8 種類のマイコプラズマ種すべてを 10 CFU/mL の感度で検出できます。
3.高い検出感度
図2. 感度テスト
4.安定性
図3. 安定性テスト
(A)凍結融解安定性: このキットは、-25 ～ -15°C で 10 回の凍結融解サイクルに耐え、性能が低下しません。
(B)加速安定性：Mycoplasma 2G ネスト PCR キットは、37°C で 14 日後も安定した状態を保ちます。
引用と参考文献:
[1] Rao XS, Cong XX, Gao XK, et al. AMPKを介したリン酸化はTBC1D17の自己阻害を促進し、Rab5依存性のグルコース取り込みを促進する。Cell Death Differ. 2021;28(12):3214-3234. doi:10.1038/s41418-021-00809-9(IF:15.828)
[2] Guo F, Li L, Li J, et al. マウス初期胚および胚性幹細胞のシングルセルマルチオミクスシーケンス. Cell Res. 2017;27(8):967-988. doi:10.1038/cr.2017.82(IF:15.606)
[3] Hao Y, He B, Wu L, et al. p85βの核移行はPI3CAヘリカルドメイン変異癌の腫瘍形成を促進する. Nat Commun. 2022;13(1):1974. 2022年4月13日発行. doi:10.1038/s41467-022-29585-x(IF:14.919)
[4] Shu X, Liu M, Lu Z, et al. ゲノムワイドマッピングにより、デオキシウリジンがヒトセントロメアDNAに豊富に存在することが明らかになった。Nat Chem Biol. 2018;14(7):680-687. doi:10.1038/s41589-018-0065-9(IF:13.843)
[5] Li X, Xiong X, Wang K, et al. トランスクリプトームマッピングにより可逆的かつ動的なN(1)-メチルアデノシンメチロームが明らかになった. Nat Chem Biol. 2016;12(5):311-316. doi:10.1038/nchembio.2040(IF:12.709)
[6] Sun L、Yang X、Huang X、et al. 脂肪酸の2-ヒドロキシ化はYAP転写軸を介して大腸がんの腫瘍形成および転移を抑制する。Cancer Res. 2021;81(2):289-302. doi:10.1158/0008-5472.CAN-20-1517(IF:12.701)
[7] Sun Z, Zhang Z, Wang QQ, Liu JL. CTPS1とATRの複合不活性化はMYC過剰発現癌細胞に対して合成的に致死的である. Cancer Res. 2022;82(6):1013-1024. doi:10.1158/0008-5472.CAN-21-1707(IF:12.701)
[8] Song J, Zhuang Y, Zhu C, et al. miRNAプロセシングとtRNA擬似ウリジル化におけるヒトPUS10の異なる役割. Nat Chem Biol. 2020;16(2):160-169. doi:10.1038/s41589-019-0420-5(IF:12.154)
[9] He B, Pan H, Zheng F, et al. 長鎖非コードRNA LINC00930は、鼻咽頭癌においてPFKFB3を介した腫瘍解糖および細胞増殖を促進する。J Exp Clin Cancer Res. 2022;41(1):77. 2022年2月24日発行。doi:10.1186/s13046-022-02282-9(IF:11.161)
[10] Tang B, Liu BH, Liu ZY, Luo MY, Shi XH, Pang DW. コンパクトな両親媒性双性イオンコーティングを施した量子ドット. ACS Appl Mater Interfaces. 2022;14(24):28097-28104. doi:10.1021/acsami.2c04438(IF:9.229)
[11] Huang C, Zhang Z, Chen L, et al. SrcのN末端およびC末端ドメインのアセチル化はSTAT3を介した腫瘍形成の異なる役割を制御する. Cancer Res. 2018;78(11):2825-2838. doi:10.1158/0008-5472.CAN-17-2314(IF:9.130)
[12] Wu X, Yu M, Zhang Z, et al. DDB2はPCNA非依存性のCDT2分解を介してDNA複製を制御する. Cell Biosci. 2021;11(1):34. 2021年2月8日発行. doi:10.1186/s13578-021-00540-5(IF:7.133)
[13] Wang J, Zhang Y, Liu X, Liu H. 腫瘍抵抗性サブポピュレーションへの到達可能性に基づく適応型治療の最適化. Cancers (Basel). 2021;13(21):5262. 2021年10月20日発行. doi:10.3390/cancers13215262(IF:6.639)
[14] Feng W, Liu R, Xie X, et al. α-チューブリンのSUMO化は微小管のダイナミクスを制御する新規修飾である. J Mol Cell Biol. 2021;13(2):91-103. doi:10.1093/jmcb/mjaa076(IF:6.216)
[15] Yu M, Hu X, Yan J, Wang Y, Lu F, Chang J. RIOK2阻害剤NSC139021は、Skp2を介した細胞周期停止およびアポトーシス誘導を介してグリオーブラストーマに対する抗腫瘍効果を発揮する。Biomedicines. 2021;9(9):1244. 2021年9月17日発行。doi:10.3390/biomedicines9091244(IF:6.081)
関連ブログ：
文書:
安全データシート
マニュアル
40614_マニュアル_Ver.EN20250612.pdf
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
あなたも好きかもしれません
よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。