説明
Hieff NGS™ RNA Lib Prep 384 CDI Primer for Illuminaは、IlluminaハイスループットシーケンシングプラットフォームのRNAライブラリ構築専用のリンカープライマーキットです。2セットに分かれており、各セットには第2世代シーケンシングライブラリで使用されるPEアダプターと、i5インデックスプライマー8種類、i7インデックスプライマー12種類が含まれています。合計16種類のi5インデックスプライマーと24種類のi7インデックスプライマーが2セットで提供され、384通りの両端インデックスラベル付きライブラリを構築できます。キットに含まれるすべての試薬は、厳格な品質管理と機能検証を受けており、ライブラリ構築の安定性と再現性を最大限に高めています。
コンポーネント
いいえ。 |
名前 |
音量 |
12414ES02 |
PEアダプター |
320μL |
RP 501-508 |
各60μL |
|
RP 701-712 |
40 μLずつ |
|
12415ES02 |
PEアダプター |
320μL |
RP 509-516 |
各60μL |
|
RP 713-724 |
40 μLずつ |
配送と保管
すべての部品はドライアイスとともに出荷され、-15℃~-25℃で18か月間保管できます。
注記:
2) 本キットに付属するPEアダプターは汎用のショートアダプターであり、完全なライブラリを得るにはPCR増幅が必要です。インデックスプライマーは、ハイスループットシーケンス中にサンプルを識別するためのバーコード配列タグを提供します。
3) このキットの各セットには、i5インデックスプライマー(RP 5xx)が8個とi7インデックスプライマー(RP 7xx)が12個含まれており、これらを組み合わせることで、96通りの両端インデックスラベル付きライブラリを構築できます。2セットには、合計16種類のi5インデックスプライマーと24種類のi7インデックスプライマーが含まれています。カタログ番号12414のi5インデックスプライマー(またはi7インデックスプライマー)とカタログ番号12415のi7インデックスプライマー(またはi5インデックスプライマー)を使用することで、最大384通りの両端インデックスラベル付きライブラリを構築できます。
4) アダプターは加熱せず、室温でゆっくりと溶解させてください。実験室の温度は20~25℃に設定するのが最適です。アダプターは凍結融解の繰り返しを避けるため、小分けにして4℃で短期間保存することをお勧めします。
5) Hieff NGS™ RNA 384 CDI Primer for Illumina™ キットを使用して構築されたシーケンス ライブラリ構造は次のとおりです。

6) 安全と健康のため、白衣と使い捨て手袋を着用してください。
7) この製品は科学研究目的のみにご使用いただけます。
説明書
1. アダプターの使用: 使用するライブラリ構築マニュアルに記載されているさまざまな入力量に対する推奨投与量に従って、適切な濃度に希釈します。
2. インデックスプライマーの使用:ライブラリ構築マニュアルの中国語ライブラリ増幅システムに従って反応系を準備し(下表参照)、反応手順はライブラリ構築マニュアルの手順に従って設定します。
名前 |
容量(μL) |
2 ×高忠実度DNA PCRミックス |
25 |
RP 5xx |
2.5 |
RP 7xx |
2.5 |
アダプター連結DNA |
20 |
合計 |
50 |
配列情報
イルミナ用PEアダプター:
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTTCTCGATC*T-3´
イルミナ用i5インデックスプライマー:
5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC [i5 インデックス] ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT -3´
イルミナ用i7インデックスプライマー:
5´- CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT [i7 インデックス] GTGACTGGAGTTCAGACCGTGTGCTCTTCCGATC -3´
[i5 インデックス] 8 bpのi5インデックス配列、 [i7 インデックス] 8 bpのi7 インデックス配列。
各プライマーに対応するインデックス名、プライマーに含まれるインデックス配列、およびシーケンス中の対応するインデックス配列情報を次の表に示します。
I5インデックス名 |
I5インデックス 順序 |
シーケンス中のインデックスシーケンス情報 |
|
NovaSeq 6000 v1.0試薬、MiSeq、 ハイシーク 2000/2500 |
NovaSeq 6000 v1. 5試薬、 MiniSeq、NextSeq、 |
||
RP501 |
タタグCCT |
タタグCCT |
アグクタタ |
RP502 |
アタガガグク |
アタガガグク |
GCCTCTAT |
RP503 |
CCTATCCT |
CCTATCCT |
アガタッグ |
RP504 |
GGCTCTGA |
GGCTCTGA |
TCAGAGCC |
RP505 |
AGGCGAAG |
AGGCGAAG |
CTTCGCCT |
RP506 |
タートクッタ |
タートクッタ |
タガッタ |
RP507 |
カガックト |
カガックト |
ACGTCCTG |
RP508 |
GTACTGAC |
GTACTGAC |
GTCAGTAC |
RP509 |
ガックタ |
ガックタ |
タカグティーシー |
RP510 |
アトガタクト |
アトガタクト |
アグタキャット |
RP511 |
GTTTCAGA |
GTTTCAGA |
TCTAAAC |
RP512 |
カカガット |
カカガット |
ATCCTGTG |
RP513 |
タグCTGCC |
タグCTGCC |
GGCAGCTA |
RP514 |
AGCGAATG |
AGCGAATG |
キャットククト |
RP515 |
タットグクトGC |
タットグクトGC |
GCAGCATA |
RP516 |
アガアガクト |
アガアガクト |
AGTCTTCT |
I7インデックス名 |
I7インデックスシーケンス |
シーケンス中のインデックスシーケンス情報 |
RP701 |
CGAGTAAT |
攻撃CG |
RP702 |
TCTCCGGA |
TCCGGAGA |
RP703 |
AATGAGCG |
CGCTCATT |
RP704 |
GGAATCTC |
ガガットCC |
RP705 |
TTCTGAAT |
アトカガ |
RP706 |
ACGAATTC |
GAATTCGT |
RP707 |
AGCTTCAG |
CTGAAGCT |
RP708 |
GCGCATTA |
TAATGCGC |
RP709 |
カタグCCG |
CGGCTATG |
RP710 |
TTCGCGGA |
TCCGCAA |
RP711 |
GCGCGAGA |
TCTCGCGC |
RP712 |
CTATCGCT |
AGCGATAG |
RP713 |
CCTACACG |
CGTGTAGG |
RP714 |
GTAGTGTC |
ガクタク |
RP715 |
TGTATGCA |
TGCATACA |
RP716 |
CCAGACTG |
CAGTCTGG |
RP717 |
AGGTGCCA |
TGGCACCT |
RP718 |
TCACCTTG |
CAAGGTGA |
RP719 |
GTATCTTT |
AAAGATAC |
RP720 |
CAGCTCCA |
TGGAGCTG |
RP721 |
TCGCCTTA |
タグGCGA |
RP722 |
CTAGTACG |
CGTACTAG |
RP723 |
AGCGTAGC |
GCTACGCT |
RP724 |
GAGCCTCG |
CGAGGCTC |
支払いとセキュリティ
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問い合わせ
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よくある質問
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