デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイキット_11402ES
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デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイキット_11402ES
デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイキット_11402ES
ホタルルシフェラーゼは分子量約61kDaのタンパク質で、ATP、マグネシウムイオン、酸素の存在下でルシフェリンをオキシルシフェリンに酸化する触媒作用を持ち、約560nmの波長の生物発光を発します。ウミシイタケルシフェラーゼは分子量約36kDaのタンパク質で、酸素の存在下でセレンテラジンをセレンテラミドに酸化する触媒作用を持ち、酸化プロセス中に480nmの波長を発します。生物発光について。両方の生物発光は化学発光によって測定できます。検出原理を図1に示します。  図1: ホタルおよびウミシイタケルシフェラーゼアッセイの概略図 通常、標的遺伝子の5'UTRまたはプロモーターをホタルルシフェラーゼの上流にクローニングするか、3'UTRをホタルルシフェラーゼの下流にクローニングし、プロモーターまたは調節要素の転写調節効果をホタルルシフェラーゼの量を検出することで検出します。細胞数、トランスフェクション効率などの差を排除するために、内部コントロールとしてレニラルシフェラーゼを使用しました。デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイキットは、ルシフェリンを基質としてホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子の活性を検出し、次にセレンテラジンを基質として蛍光反応を消光しながらレニラルシフェリン酵素レポーター遺伝子活性を検出します。キットは高感度という特徴があります。 特徴 強化された溶解能力: ほとんどの細胞タイプを完全に溶解できます。 より強いシグナル: 弱いプロモーター発現の正確な検出。 より高い感度: 10～20 ピコモルのルシフェラーゼ分子まで検出可能。 より広い線形範囲: 線形検出範囲は酵素濃度の 8 桁を超えます。 アプリケーション  miRNAと標的遺伝子3'UTRの相互作用の検証 lncRNA-miRNA相互作用の検証 プロモーター領域における転写因子制御の検証 シグナル伝達経路解析 SNP活性解析 仕様 形状 液体 ルシフェラーゼ ホタルとレニラ 信号の半減期 30分 製品コンポーネントの数 5 ワークフロー 2つのステップ コンポーネント コンポーネント番号 名前 11402ES60 11402ES80 11402-A 細胞溶解物 20mL 10×20mL 11402-B ホタルルシフェラーゼバッファー 10mL 10×10mL 11402-C ホタルルシフェラーゼ基質（50×） 200μL 10×200μL 11402-D ウミシイタケルシフェラーゼバッファー 10mL 10×10mL 11402-E ウミシイタケルシフェラーゼ基質（50 ×） 200μL 10×200μL 配送と保管 デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイキット製品は、-15℃～-25℃で1年間保存する必要があります。 数字 図1. YEASEN （カタログ番号：11402）は、ブランドPと同等の蛍光強度を持っています。 図2 . Y EASEN (カタログ番号: 11402) 検出試薬はルシフェラーゼと相互作用して最適な発光強度を実現します。 Renilla ルシフェラーゼ基質を添加すると、ホタル ルシフェラーゼの生物発光が消光します。実質的に完全に消光できます。                                 ...

Frequently Bought Together

デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイキット_11402ES

YeasenSKU: 11402ES10
サイズ: 10 トン
価格:
$25.00
在庫:
在庫あり

ホタルルシフェラーゼは分子量約61kDaのタンパク質で、ATP、マグネシウムイオン、酸素の存在下でルシフェリンをオキシルシフェリンに酸化する触媒作用を持ち、約560nmの波長の生物発光を発します。ウミシイタケルシフェラーゼは分子量約36kDaのタンパク質で、酸素の存在下でセレンテラジンをセレンテラミドに酸化する触媒作用を持ち、酸化プロセス中に480nmの波長を発します。生物発光について。両方の生物発光は化学発光によって測定できます。検出原理を図1に示します。

図1: ホタルおよびウミシイタケルシフェラーゼアッセイの概略図

通常、標的遺伝子の5'UTRまたはプロモーターをホタルルシフェラーゼの上流にクローニングするか、3'UTRをホタルルシフェラーゼの下流にクローニングし、プロモーターまたは調節要素の転写調節効果をホタルルシフェラーゼの量を検出することで検出します。細胞数、トランスフェクション効率などの差を排除するために、内部コントロールとしてレニラルシフェラーゼを使用しました。デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイキットは、ルシフェリンを基質としてホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子の活性を検出し、次にセレンテラジンを基質として蛍光反応を消光しながらレニラルシフェリン酵素レポーター遺伝子活性を検出します。キットは高感度という特徴があります。

特徴

強化された溶解能力: ほとんどの細胞タイプを完全に溶解できます。

より強いシグナル: 弱いプロモーター発現の正確な検出。

より高い感度: 10～20 ピコモルのルシフェラーゼ分子まで検出可能。

より広い線形範囲: 線形検出範囲は酵素濃度の 8 桁を超えます。

アプリケーション

miRNAと標的遺伝子3'UTRの相互作用の検証

lncRNA-miRNA相互作用の検証

プロモーター領域における転写因子制御の検証

シグナル伝達経路解析

SNP活性解析

仕様

形状

液体

ルシフェラーゼ

ホタルとレニラ

信号の半減期

30分

製品コンポーネントの数

5

ワークフロー

2つのステップ

コンポーネント

コンポーネント番号

名前

11402ES60

11402ES80

11402-A

細胞溶解物

20mL

10×20mL

11402-B

ホタルルシフェラーゼバッファー

10mL

10×10mL

11402-C

ホタルルシフェラーゼ基質（50×）

200μL

10×200μL

11402-D

ウミシイタケルシフェラーゼバッファー

10mL

10×10mL

11402-E

ウミシイタケルシフェラーゼ基質（50 ×）

200μL

10×200μL

配送と保管

デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイキット製品は、-15℃～-25℃で1年間保存する必要があります。

数字

図1. YEASEN （カタログ番号：11402）は、ブランドPと同等の蛍光強度を持っています。

図2 . Y EASEN (カタログ番号: 11402) 検出試薬はルシフェラーゼと相互作用して最適な発光強度を実現します。 Renilla ルシフェラーゼ基質を添加すると、ホタル ルシフェラーゼの生物発光が消光します。実質的に完全に消光できます。

ドキュメント:

安全データシート

11402 MSDS HB220209 EN.PDF

マニュアル

11402 マニュアル HB241230 EN.pdf

引用と参考文献:

[1] Wang H、Yang J、Cai Y、Zhao Y. マクロファージはIFNを介した細胞間自己刺激回路を介して生体内で線維芽細胞の心臓リプログラミングを抑制する[Protein Cellに掲載された訂正。2024年12月2日;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]。 (IF=21.1)

[2] Zhao L、Zhu Y、Tao H、他。アイラントンは、JUN 依存性の MEOX1 活性化を抑制することで肺線維症を改善します。 Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560。 doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013 (IF=14.5)

[ 3 ] Wu X、Chen S、Zhang Z、et al. ウイルスの小分子干渉RNA-宿主植物mRNA経路は、オートファジーを強化することでウイルス誘導性の干ばつ耐性を調節する。Plant Cell. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158 (IF=12.6)

[ 4 ] Xuan H、Li Y、Liu Y、et al. H1/H5ドメインはイネの発育中のOsTRBF2相分離と遺伝子抑制に寄与する。Plant Cell. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199 (IF=12)

[ 5 ] Han Y、Hu Q、Gong N、et al. MORE GRAINS 1の自然変異がイネの穀粒数と穀粒重量を制御する。J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674 (IF=11.4)

[ 6 ] Pan M、Luo M、Liu L、et al。EGR1 は PFKL の転写をダウンレギュレーションすることで HCC の増殖と好気性解糖を抑制する。J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35。2024 年 1 月 29 日発行。doi:10.1186/s13046-024-02957-5 (IF=11.3)

[ 7 ] Hao X、Wang S、Fu Y、et al. WRKY46-MYC2 モジュールは、フラボノイドの蓄積を促進することにより、E-2-ヘキセナール誘導性抗草食動物反応において重要な役割を果たします。Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734 (IF=10.5)

[ 8 ] Wu J、Li P、Li M、et al. 熱ストレスはトマトのBR-SlCRCaカスケードに影響を与え、花芽分裂組織の終結と果実の発育を阻害する。Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790 (IF=10.5)

[ 9 ] Chen L、Xia S、Wang F、et al. m6Aメチル化誘導性NR1D1アブレーションはHSC概日時計を乱し、肝線維症を促進する。Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704 (IF=10.33)

[ 10 ] Niu MX、Feng CH、He F、et al. miR6445-NAC029 モジュールは、ポプラにおけるグルタチオン S-トランスフェラーゼ U23 の発現と活性酸素種の除去を制御することにより、干ばつ耐性を制御します。New Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703 (IF=9.4)

[ 11 ]Huang T、You Q、Huang D、et al。PDIA3P1とOCT4間の正のフィードバックは食道扁平上皮癌の癌幹細胞特性を促進する。Cell Commun Signal。2024;22(1):60。2024年1月22日発行。doi:10.1186/s12964-024-01475-3 (IF=8.4)

[ 12 ]Wang S, Liu Y, Hao X, Chen Y, Wang Z, Shen Y. 砂漠の低木における植物ディフェンシンの強化：AnWRKY29の調節経路の探究。Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259 (IF=8.2)

Storage

The Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit products should be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Yes, they can be stored at -80°C, similar to standard protein storage protocols. Lysed samples can be stored at -80°C for up to 6 months and at -20°C for up to 1 month.
Strict light protection is not required during operation. However, store them protected from light. Low temperature is a more critical storage condition—especially for coelenterazine (the Renilla substrate), which is recommended to be stored at -80°C.
The ratio should be adjusted according to specific experimental conditions. Pilot experiments are recommended—for instance, testing Renilla vector to Firefly vector ratios at 1:10, 1:20, 1:50, and 1:100.
They are assayed in the same well. There is no mutual interference because the Renilla luciferase substrate reagent contains a compound that quenches Firefly luminescence. While separate assays are possible, sequential measurement in a single well is standard.
Different microplate readers vary in sensitivity and parameter settings, which can lead to differences in background signal readings for the same sample.
Opaque white microplates.
Add 0.3 mL of Triton X-100 to 10 mL of PBS to prepare a 3% Triton X-100 solution.
Dilute the cell lysate sample 5-fold prior to testing.
1. Luciferase is expressed intracellularly and is a enzyme non-native to humans (yielding extremely low background). It cannot cross cell membranes. In contrast, luciferase substrates are hydrophobic, cyclic small molecules that penetrate cell membranes easily. Thus, any luciferase expression is exogenous, and adding substrate directly to culture media or injecting it in vivo yields detectable signals.
2. In vitro reporter assays require cell lysis to homogenize samples, overcoming transfection heterogeneity, uneven substrate permeability, and signal variation. In vitro reporter assays are highly quantitative and sensitive, requiring ATP and oxygen. Cell lysis fully releases expressed luciferase to optimize the reaction; since intracellular oxygen is limited, omitting lysis leads to signal reduction (some lysis buffers include optimized additives like ATP to boost signal). Therefore, cell lysis ensures superior signal in in vitro assays. 3. In vivo imaging instruments possess high sensitivity and power capable of penetrating skin and tissue, enabling strong signal detection without cell lysis.
No, the order cannot be adjusted. In this kit, Component B (Firefly Luciferase Buffer) is essential for detecting both Firefly and Renilla luciferases. The optimal reaction environment for Renilla luciferase requires the presence of Component B; otherwise, Renilla luciferase readings will be extremely low.

Citations

Documents

Manual
11402_Manual_HB260114_EN.pdf
MSDS
11402_MSDS_HB220209_EN.pdf

Applications

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問い合わせ

よくある質問

この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、Yeasen Biotechnology が所有する特許、商標、著作権によって保護されています。商標記号は原産国を示しますが、必ずしもすべての地域で登録されているわけではありません。

特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。

Yeasen は倫理的な科学に専念しており、私たちの研究は安全性と倫理基準を確保しながら重要な問題に取り組むべきだと考えています。