Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester plus) は、Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester plus) のアップグレード版です。前世代のHifair™ Ⅲ Reverse Transcriptaseと比較して、阻害剤耐性の向上、逆転写速度の高速化、cDNA収量の増加を実現し、動物、植物、微生物由来のRNAの逆転写反応に最適です。本製品に含まれるgDNA Digester Mix -V2は、残留DNA除去能力が大幅に向上し、最大1000 ngのDNAを効果的に分解します。RNAテンプレートへのDNAコンタミネーションを排除することで、より信頼性の高い結果を保証します。

Hifair™ AdvanceFast SuperMixには、逆転写に必要なすべての成分が含まれています。RNAテンプレートとRNaseフリーのH2Oを加えるだけで反応が開始され、同時にgDNA Digesterの活性が停止し、cDNAの完全性が確保されます。

逆転写製品は、色素ベースおよびプローブベースのqPCRに適しています。ただし、遺伝子クローニングなどの長鎖断片の増幅には推奨されません。このような用途では、高効率逆転写のためにHifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA合成キット（カタログ番号11150ES）を推奨します。 

特徴

• 高速かつシンプル- 逆転写はわずか 5 分で完了し、ワークフローの合計時間は 7 分 5 秒です。
• 高効率- より高い cDNA 収量とより低い Ct 値を実現し、より信頼性の高い結果を実現します。
• 高感度- 10 pg という少量の RNA を検出します。
• 堅牢なパフォーマンス- 分解された RNA や阻害剤を含むサンプルからでも高い収量を維持します。
• 強化された DNA 消化– より多くの残留 DNA を効果的に除去し、下流のアプリケーションをよりクリーンにします。
• 安定性と信頼性– cDNA は室温で 7 日間安定した状態を保ち、試薬は性能低下なく最大 30 回の凍結融解サイクルに耐えます。

コンポーネント

ストレージ

この製品は-25〜-15℃で1年間保管してください。

応用

RNA検出

数字

1. ワークフロー: 高速かつシンプル

図 1. ワークフローの比較: 11155ES はわずか 5 分で逆転写を完了します (合計時間は約 7 分)。これは一般的な試薬 (約 17 分) よりも大幅に高速です。

2. 高効率合成 – 多様なターゲットと種にわたって優れたcDNA収量

図2. 逆転写効率の比較

様々なソース由来のRNAを用いて、異なる逆転写試薬を用いてそれぞれのプロトコルに従いcDNA合成を行いました。色素ベースのqPCR解析により、11155ESは他の試薬と比較して一貫して高いcDNA収量と低いCt値をもたらし、ΔCt値に反映されることが示されました。

3. 高感度 - 10 pgのRNAも検出

図3. 逆転写感度の比較

ヒト293T細胞およびシロイヌナズナ由来のRNAを段階希釈し、異なるインプット量でcDNA合成を行いました。プロトコルに従い、様々な逆転写試薬を用いてcDNA合成を行い、Yeasen色素ベースのqPCR試薬を用いてqPCRを行いました。ΔCt値（Ct値（他の試薬）- Ct値（11155ES））は、他の逆転写試薬と比較して、11155ESが様々なRNAインプット量において一貫して優れた性能を発揮することを示しています。

4. 強化されたgDNA除去 – より効果的な残留DNA消化

図4. gDNAの消化/除去能力の比較

ヒト293T細胞由来のゲノムDNA（1000 ng）を鋳型として使用した。様々な逆転写試薬をそれぞれのプロトコルに従って試験し、gDNAを消化しない対照群も用意した。その後、逆転写反応を行い、Yeasen 11185ESを用いてqPCRを実施した。結果は、この試薬が残留gDNAを効果的に消化・除去することを示すものであった。

5. 強力な安定性

図5. 安定性テスト

(A) 凍結融解サイクルを繰り返した後の性能。0、10、20、または30回の凍結融解サイクルを経た逆転写試薬を用いて逆転写反応を行い、その後、色素を用いたqPCRを行った。10～30回の凍結融解サイクルを経たサンプルのCт値は、コントロール（0サイクル）と比較して最小限の変動を示し、0.5Cт以内であった。

(B) 異なる保存条件下での安定性。合成cDNAの安定性を様々な条件下で保存後に評価した。製品番号11155ESを用いて生成したcDNAは、Yeasen色素ベースのqPCRマスターミックスを用いたqPCRの前に、それぞれ-80℃、-20℃、4℃、25℃、37℃で1～7日間保存した。データは、-80℃以外の条件下で保存したサンプルから得られたCт値が、-80℃で保存したサンプルから得られたCт値と非常に一致しており、その差は0.5Cт以内であったことを示している。

注記

1. この製品は研究用途にのみご使用ください。

2. 安全のため、白衣と使い捨て手袋を着用して作業してください。

3. サンプルの完全性を維持するために、すべてのピペッティングと混合の手順を氷上で実行します。

4. 使用前に各成分をゆっくりと反転させて低速で遠心分離し、適切に混合されていることを確認します。

書類：

安全データシート

11155_MSDS_HB250811_EN.PDF

マニュアル

11155_マニュアル_Ver.EN20250211.pdf

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