Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA 合成スーパーミックス qPCR 用 (gDNA ダイジェスタープラス) _ 11155ES

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Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA 合成スーパーミックス qPCR 用 (gDNA ダイジェスタープラス) _ 11155ES

Manual
MSDS

Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester plus) は、Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester plus) のアップグレード版です。前世代のHifair™ Ⅲ Reverse Transcriptaseと比較して、阻害剤耐性の向上、逆転写速度の高速化、cDNA収量の増加を実現し、動物、植物、微生物由来のRNAの逆転写反応に最適です。本製品に含まれるgDNA Digester Mix -V2は、残留DNA除去能力が大幅に向上し、最大1000 ngのDNAを効果的に分解します。RNAテンプレートへのDNAコンタミネーションを排除することで、より信頼性の高い結果を保証します。 Hifair™ AdvanceFast SuperMixには、逆転写に必要なすべての成分が含まれています。RNAテンプレートとRNaseフリーのH2Oを加えるだけで反応が開始され、同時にgDNA Digesterの活性が停止し、cDNAの完全性が確保されます。逆転写製品は、色素ベースおよびプローブベースのqPCRに適しています。ただし、遺伝子クローニングなどの長鎖断片の増幅には推奨されません。このような用途では、高効率逆転写のためにHifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA合成キット（カタログ番号11150ES）を推奨します。特徴高速かつシンプル- 逆転写はわずか 5 分で完了し、ワークフローの合計時間は 7 分 5 秒です。高効率- より高い cDNA 収量とより低い Ct 値を実現し、より信頼性の高い結果を実現します。高感度- 10 pg という少量の RNA を検出します。堅牢なパフォーマンス- 分解された RNA や阻害剤を含むサンプルからでも高い収量を維持します。強化された DNA 消化– より多くの残留 DNA を効果的に除去し、下流のアプリケーションをよりクリーンにします。安定性と信頼性– cDNA は室温で 7 日間安定した状態を保ち、試薬は性能低下なく最大 30 回の凍結融解サイクルに耐えます。コンポーネントコンポーネント番号名前 11155ES10 11155ES60 11155-A Hifair ™アドバンスファストスーパーミックス 60μL 600μL...

Frequently Bought Together

Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA 合成スーパーミックス qPCR 用 (gDNA ダイジェスタープラス) _ 11155ES

YeasenSKU: 11155ES10

サイズ: 10 トン

バリエーション

価格:

$55.00

在庫:

在庫あり

量:

Hifair™ AdvanceFast SuperMixには、逆転写に必要なすべての成分が含まれています。RNAテンプレートとRNaseフリーのH2Oを加えるだけで反応が開始され、同時にgDNA Digesterの活性が停止し、cDNAの完全性が確保されます。

逆転写製品は、色素ベースおよびプローブベースのqPCRに適しています。ただし、遺伝子クローニングなどの長鎖断片の増幅には推奨されません。このような用途では、高効率逆転写のためにHifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA合成キット（カタログ番号11150ES）を推奨します。

特徴

高速かつシンプル- 逆転写はわずか 5 分で完了し、ワークフローの合計時間は 7 分 5 秒です。
高効率- より高い cDNA 収量とより低い Ct 値を実現し、より信頼性の高い結果を実現します。
高感度- 10 pg という少量の RNA を検出します。
堅牢なパフォーマンス- 分解された RNA や阻害剤を含むサンプルからでも高い収量を維持します。
強化された DNA 消化– より多くの残留 DNA を効果的に除去し、下流のアプリケーションをよりクリーンにします。
安定性と信頼性– cDNA は室温で 7 日間安定した状態を保ち、試薬は性能低下なく最大 30 回の凍結融解サイクルに耐えます。

コンポーネント

コンポーネント番号	名前	11155ES10	11155ES60
11155-A	Hifair ™アドバンスファストスーパーミックス	60μL	600μL
11155-B	gDNAダイジェスターミックス -V2	20μL	200μL
11155-C	RNaseフリーH ₂ O	200μL	2×1mL

ストレージ

この製品は-25〜-15℃で1年間保管してください。

応用

RNA検出

数字

1. ワークフロー: 高速かつシンプル

図 1. ワークフローの比較: 11155ES はわずか 5 分で逆転写を完了します (合計時間は約 7 分)。これは一般的な試薬 (約 17 分) よりも大幅に高速です。

2. 高効率合成 – 多様なターゲットと種にわたって優れたcDNA収量

図2. 逆転写効率の比較

様々なソース由来のRNAを用いて、異なる逆転写試薬を用いてそれぞれのプロトコルに従いcDNA合成を行いました。色素ベースのqPCR解析により、11155ESは他の試薬と比較して一貫して高いcDNA収量と低いCt値をもたらし、ΔCt値に反映されることが示されました。

3. 高感度 - 10 pgのRNAも検出

図3. 逆転写感度の比較

ヒト293T細胞およびシロイヌナズナ由来のRNAを段階希釈し、異なるインプット量でcDNA合成を行いました。プロトコルに従い、様々な逆転写試薬を用いてcDNA合成を行い、Yeasen色素ベースのqPCR試薬を用いてqPCRを行いました。ΔCt値（Ct値（他の試薬）- Ct値（11155ES））は、他の逆転写試薬と比較して、11155ESが様々なRNAインプット量において一貫して優れた性能を発揮することを示しています。

4. 強化されたgDNA除去 – より効果的な残留DNA消化

図4. gDNAの消化/除去能力の比較

ヒト293T細胞由来のゲノムDNA（1000 ng）を鋳型として使用した。様々な逆転写試薬をそれぞれのプロトコルに従って試験し、gDNAを消化しない対照群も用意した。その後、逆転写反応を行い、Yeasen 11185ESを用いてqPCRを実施した。結果は、この試薬が残留gDNAを効果的に消化・除去することを示すものであった。

5. 強力な安定性

図5. 安定性テスト

(A) 凍結融解サイクルを繰り返した後の性能。0、10、20、または30回の凍結融解サイクルを経た逆転写試薬を用いて逆転写反応を行い、その後、色素を用いたqPCRを行った。10～30回の凍結融解サイクルを経たサンプルのCт値は、コントロール（0サイクル）と比較して最小限の変動を示し、0.5Cт以内であった。

(B) 異なる保存条件下での安定性。合成cDNAの安定性を様々な条件下で保存後に評価した。製品番号11155ESを用いて生成したcDNAは、Yeasen色素ベースのqPCRマスターミックスを用いたqPCRの前に、それぞれ-80℃、-20℃、4℃、25℃、37℃で1～7日間保存した。データは、-80℃以外の条件下で保存したサンプルから得られたCт値が、-80℃で保存したサンプルから得られたCт値と非常に一致しており、その差は0.5Cт以内であったことを示している。

注記

1. この製品は研究用途にのみご使用ください。

2. 安全のため、白衣と使い捨て手袋を着用して作業してください。

3. サンプルの完全性を維持するために、すべてのピペッティングと混合の手順を氷上で実行します。

4. 使用前に各成分をゆっくりと反転させて低速で遠心分離し、適切に混合されていることを確認します。

書類：

安全データシート

11155_MSDS_HB250811_EN.PDF

マニュアル

11155_マニュアル_Ver.EN20250211.pdf

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

Is it necessary to add additional primers during reverse transcription?

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.

How did you mix the reagents before?

For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.

What is the range of RNA input that the 11155ES can accommodate?

The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.

Could a longer reverse transcription time be considered?

It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.

After the reverse transcription is completed, can it be left in the PCR instrument for a long time?

For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.

After the reverse transcription is completed, is it necessary to measure the concentration and adjust it to a certain level before conducting the fluorescence quantitative PCR?

No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.

After reverse transcription is completed, if the resulting product is not used in time and is not returned to the refrigerator, will it have any impact on the experiment?

The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.

If the reagent is opened but not fully used, can it be stored at 4℃?

After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.

For downstream real-time quantitative PCR (qPCR) assays, which reagents do you recommend using?

Citations

Documents

Brochure
Molecular_Biology_Reagents_Solutions.pdf

Applications

よくある質問

法律および免責事項

この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、Yeasen Biotechnology が所有する特許、商標、著作権によって保護されています。商標記号は原産国を示しますが、必ずしもすべての地域で登録されているわけではありません。

特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。

Yeasen は倫理的な科学に専念しており、私たちの研究は安全性と倫理基準を確保しながら重要な問題に取り組むべきだと考えています。

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