説明
Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester Plus) は、Hifair™ Ⅲ逆転写酵素をベースに開発された再調整プレミックスです。Hifair™ Ⅱ逆転写酵素と比較して、Hifair™ Ⅲ逆転写酵素は熱安定性が大幅に向上し、60℃までの反応温度に耐えることができ、複雑な二次構造を持つRNAテンプレートの逆転写に適しています。同時に、酵素はテンプレートとの親和性を高めているため、少量のテンプレートや低コピー遺伝子の逆転写に最適です。
プレミックスには、5×gDNA Digester Mixと4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plusが含まれています。5×gDNA Digester Mixは、RNAテンプレート内の残留ゲノムDNA汚染を除去し、より信頼性の高いフォローアップ結果を保証します。4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plusには、逆転写酵素に必要なすべてのコンポーネント（バッファー、dNTP、Hifair™ Ⅲ逆転写酵素、RNase阻害剤、ランダムプライマー/オリゴ（dT）18プライマーミックス）が含まれており、RNAテンプレートとRNaseフリーH2Oが逆転写に追加され、gDNA Digesterが同時に終了してcDNAの整合性が確保されます。
本製品は2ステップRT-QPCR検出に適しており、qPCRに特化して最適化されたランダムプライマー/オリゴ(dT)18プライマーミックスにより、RNA転写産物のあらゆる領域から均一な逆転写効率でcDNA合成を開始できます。qPCR結果の信頼性と再現性は最大限に保証されています。本逆転写製品はSYBR Green法およびTaqManプローブ法qPCRと互換性があり、Hifair™ UNICON™ qPCR SYBR Greenマスターミックス、Hifair™ qPCR SYBR Greenマスターミックス、またはHifair™ qPCR TaqManプローブマスターミックスを実験目的に応じて選択し、組み合わせて使用することで高性能な遺伝子発現解析を行うことができます。
特徴
- 高性能逆転写
- 反応温度を上げる - 第一鎖cDNAは55～60℃の温度範囲で合成できる
- ゲノム残基の効率的な除去
- 広い線形検出範囲
アプリケーション
- cDNAライブラリの構築
- アンチセンスRNA合成
仕様
| 最終製品の種類 | cDNA（ファーストストランド） |
| PCR法 | RT-PCR |
| 試薬の種類 | 逆転写 |
| サンプルの種類 | RNA |
| 最適反応温度 | 55℃～60℃ |
| 逆転写酵素 | M-MLV |
コンポーネント
| コンポーネント番号 | 名前 | 11141ES10 (10T) | 11141ES60 (100T) |
| 11141-A | RNaseフリーH 2 O | 1mL | 2×1mL |
| 11141-B | 5×gDNA消化ミックス | 30μL | 300μL |
| 11141-C | 4×HifairTM Ⅲ スーパーミックスプラス | 50μL | 500μL |
配送と保管
製品はドライアイスとともに出荷され、-15℃～-25℃で18ヶ月間保管可能です。
数字
図1. GC含量が異なる遺伝子の発現レベルに適した優れた逆転写効率
図2. 直線アッセイ範囲 Total RNA 5 pg~5 μg
図3. ゲノム残基の効率的な除去
「単一点変異識別が可能なRNA切断トレオース核酸酵素。Nat Chem . 2022年3月;14(3):350-359. doi: 10.1038/s41557-021-00847-3」より引用。
「テトラトリコペプチドリピートタンパク質OsTPR075はイネのフロリゲン輸送を制御して出穂を促進する。Plant Cell . 2022年9月27日;34(10):3632-3646. doi: 10.1093/plcell/koac190」より引用。
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