バイオメディカル研究分野において、タンパク質精製は生命の謎を解明する鍵となる技術です。しかしながら、従来の精製法は、特に構造生物学研究の焦点である膜タンパク質において、非効率性と高コストという課題を抱えています。これらのタンパク質は構造が複雑で、細胞膜における発現レベルが低く、環境条件に敏感であるため、精製は特に困難です。Yeasen Biotechは、優れた研究開発力を活かし、改良された抗DYKDDDDK（Flag）アフィニティーゲル（可溶性および膜タンパク質）を発売しました。 (カタログ番号 20585ES) は、困難な膜タンパク質であっても、効率的かつ簡便にタンパク質を精製できる強力なツールです。
製品パフォーマンス
1. 高い特異性と高い結合容量：標的タンパク質捕捉における主な利点
Yeasen 抗DYKDDDDK（フラグ）アフィニティーゲル（可溶性および膜タンパク質） (カタログ番号20585ES)は、高品質のマウスIgG2bモノクローナル抗体を4%の高度に架橋したアガロースゲルに共有結合させることで調製されています。この独自の製造プロセスにより、極めて高い特異性が得られ、Flagタグと融合したタンパク質を正確に認識して結合することができます。Met修飾N末端Flag融合タンパク質（ Met-Flag-Protein ）、N末端Flag融合タンパク質（ Flag-Protein ）、C末端Flag融合タンパク質（ Protein-Flag ）など、あらゆるタンパク質をゲル中で容易に取り扱うことができます。
膜タンパク質の精製において、この特異性は特に重要です。なぜなら、これらのタンパク質は構造が複雑で、他のタンパク質と非特異的に結合しやすいからです。Flagゲルの高い特異性は、非特異的タンパク質による干渉を効果的に低減し、精製された膜タンパク質の高純度を保証します。さらに、このゲルはFlagタグ融合タンパク質に対して高い結合能を有しています（少なくとも1.1 mgタンパク質/mLゲル）。つまり、標的タンパク質の発現レベルが低い場合でも、Flagゲルを用いることで効率的に捕捉・精製できるということです。
2.高純度・高収率：下流アプリケーションを可能にする
Yeasen 抗DYKDDDDK（フラグ）アフィニティーゲル（可溶性および膜タンパク質） (カタログ番号20585ES)は不純物の非特異的結合が最小限に抑えられており、精製後には極めて純度の高いタンパク質サンプルが得られます。これは、生物活性アッセイや構造解析といった下流アプリケーションにおいて極めて重要です。高純度のタンパク質サンプルはより正確な実験データを提供し、研究者の研究に確固たる基盤を築きます。
3.最適化された実験ワークフロー：タンパク質精製の課題を簡素化
タンパク質の精製は、特に複雑な膜タンパク質の場合、タンパク質の構造的損傷を避けるために、穏やかな条件下で行う必要があります。Yeasen Anti-DYKDDDDK (Flag) アフィニティーゲル (可溶性および膜タンパク質) (カタログ番号20585ES)はこの点を考慮して設計されています。保存バッファーはpH 7.4の50%グリセロールを含むTBSで、ゲルの活性を保護するだけでなく、タンパク質精製のための穏やかな環境を提供します。
Flagゲルを用いた精製プロセスはシンプルかつ効率的です。1×Flagペプチド溶出を容易にするために、製品パッケージには1×Flagペプチド（カタログ番号20572ES）が付属しています。これにより、溶出プロセスは穏やか（タンパク質へのダメージがほとんどない）かつ非常に簡便（実験の容易性をさらに向上）になります。
4. 多様なサイズと柔軟な配送オプション：多様な実験ニーズに対応
Yeasenは、様々な研究室の規模とニーズを考慮し、 1mL、5mL、25mL、100mLを含む複数のサイズでFlagゲルを提供しています。小規模な予備研究から大規模なタンパク質生産まで、最適なオプションをご用意しています。年間大量購入の場合は、バッチ配送を選択できるため、過剰在庫のプレッシャーを回避しながら価格割引を受けることができます。
テストデータ
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M: タンパク質マーカー 1: Flag-N/Flag-M/Flag-Cタンパク質のプレカラム粗サンプル 2: Flag-N/Flag-M/Flag-Cタンパク質のポストカラムフロースルー 3：溶出（pH 2.7溶出） 4：溶出（pH 12溶出） 5: 溶出（1 × Flagペプチド溶出） 6: 精製ゲル（pH 2.7溶出） 7: 精製ゲル（pH 12溶出） 8: 精製ゲル（1 × Flagペプチド溶出） a ：旗-N b ：旗-M c ：旗-C |
図1 。 Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) アフィニティーゲル精製の結果、低発現タンパク質 (Flag-N (a)、Flag-M (b)、Flag-C (c)) が SDS-PAGE に表示されています。
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M: タンパク質マーカー 1: Flag-Cタンパク質のプレカラム粗サンプル 2: Flag-Cタンパク質のカラム通過後 3：溶出（pH 2.7溶出） 4：溶出（pH 12溶出） 5: 溶出（1 × Flagペプチド溶出） 6: 精製ゲル（pH 2.7溶出） 7: 精製ゲル（pH 12溶出） 8: 精製ゲル（1 × Flagペプチド溶出） a ：イェーセン b ：ブランドS* c ：ブランドG* |
図2. SDS-PAGE で示された低発現タンパク質 (膜タンパク質など) の精製におけるYeasen (a) とB rand S* (b) およびB rand G* (c) Anti-Flag ゲルの比較。
結論:
1. Yeasen 抗DYKDDDDK（フラグ）アフィニティーゲル（可溶性および膜タンパク質） (Cat#20585ES)は特異性が高く、さまざまな位置の Flag タグ (N 末端 Flag 融合タンパク質、Met 修飾 N 末端 Flag 融合タンパク質、C 末端 Flag 融合タンパク質) に結合することができます。
2.標的タンパク質の発現が非常に低い条件（例えば、膜タンパク質）では、Yeasen Anti-DYKDDDDK（Flag）アフィニティーゲル（可溶性および膜タンパク質） （カタログ番号20585ES）は、競合他社と比較して大幅に高い収率と純度を実現します。Yeasenの使用により、 溶出用の無料の 1×Flag ペプチド (Cat#20572ES) を使用すると、さらに優れた結果が得られます。
フラグタグ融合タンパク質のための完全なソリューション:
組換えエンテロキナーゼ（カタログ番号20395ES） ：リジンのカルボキシル末端を切断する特異的プロテアーゼで、その前に4つのアスパラギン酸（Asp-Asp-Asp-Asp-Lys）が続きます。この配列は、オクタペプチドFlagタグ（DYKDDDDK）の一部です。組換えエンテロキナーゼ（rEK）は、融合タンパク質からFlagタグを容易に除去できるため、天然タンパク質の構造と機能の研究に最適なツールです。
抗DYKDDDDK(Flag) MagBeads (Cat#20565ES) : 高品質のマウス抗DYKDDDDK(Flag)モノクローナル抗体をシリカベースの磁性ビーズ(直径 の これらのビーズは、Flag タグ付きのタンパク質の免疫沈降 (IP) または共免疫沈降 (Co-IP) に適しています。
製品情報
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製品名 |
製品番号 |
仕様 |
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抗DYKDDDDK（フラグ）アフィニティーゲル（可溶性および膜タンパク質） |
1 mL / 5 mL/25 mL |
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酵母で発現した組換えウシエンテロキナーゼ、His |
100 U / 500 U/5000 U |
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反DYKDDDDK（旗）マグビーズ |
1 mL / 5 mL |