وصف
هيفير™ مجموعة RT-qPCR المتقدمة بخطوة واحدة هي مجموعة لقياس كمية الفلورسنت باستخدام صبغة SYBR Green I. باستخدام بادئات خاصة بالجينات، تُجرى تفاعلات النسخ العكسي وqPCR في أنبوب واحد، مما يُغني عن عمليات فتح الغطاء والسحب المتكررة، مما يُحسّن كفاءة التحليل بشكل كبير ويُقلل من خطر التلوث. بالنسبة لعينات الحمض النووي الريبي، تستخدم المجموعة أغشية Hifair المقاومة للحرارة.™ النسخ العكسي V لتخليق cDNA بكفاءة وUNICON™ بوليميراز الحمض النووي "هوت ستارت تاك" للتضخيم الكمي. في ظل نظام العازل المُحسَّن، يمكن أن تصل حساسية الجهاز إلى 0.1 بيكوغرام للأهداف عالية التعبير، و1 بيكوغرام للأهداف متوسطة التعبير. كما أنه مناسب لتضخيم عينات الحمض النووي وتحديد كميتها. يتيح الجهاز الكشف الدقيق عن الأحماض النووية وتحديد كميتها من عينات نباتية وحيوانية مختلفة، ومن الخلايا والكائنات الدقيقة.
تحديد
| رقم القطعة | 11175ES20 / 11175ES70 |
| مقاس | 20 تي/200 ت |
عناصر
| المكونات رقم | اسم | 11175ES20 | 11175ES70 |
| 11175-أ | 2× هيفير™ مخزن SG المتقدم | 250 ميكرولتر | 2×1.25 مل |
| 11175-ب | هيفير™ مزيج إنزيم UH المتقدم | 20 ميكرولتر | 200 ميكرولتر |
| 11175-ج | بروتين RNase Free H2ا | 250 ميكرولتر | 2×1.25 مل |
تخزين
يجب تخزين هذا المنتج في درجة حرارة -25~-15 درجة مئوية بعيد من ضوء ل 1 سنة.
تعليمات
- رد فعل نظام إعدادات*****
| عناصر | الحجم (ميكرولتر)**** | الحجم (ميكرولتر) | التركيز النهائي |
| 2× هيفير™ مخزن SG المتقدم* | 12.5 | 25 | 1× |
| هيفير™ مزيج إنزيم UH المتقدم | 1 | 2 | - |
| مادة تمهيدية (10 ميكرومول/لتر)** | 0.5 | 1 | 0.2 ميكرومول/لتر |
| برايمر عكسي (10 ميكرومول/لتر)** | 0.5 | 1 | 0.2 ميكرومول/لتر |
| الحمض النووي الريبوزي*** | إكس | إكس | - |
| بروتين RNase Free H2ا | إلى 25 | ل 50 | - |
* تُحضّر نماذج روكس المنخفضة والنماذج بدون تصحيح روكس مباشرةً وفقًا لنظام التفاعل المذكور أعلاه. عند استخدام نموذج روكس المرتفع، أضف هيف™ إس بي هاي روكس إلى مُنظّف هيف™ أدفانسد إس جي (Hieff™ Advanced SG Buffer) بتركيز 1:250، ثم اخلط جيدًا، ثم استخدم جهاز الطرد المركزي.™ لا يؤثر Advanced SG Buffer مع Hieff™ SP High Rox على استخدام نماذج التصحيح Low Rox وNo Rox.
** وكان تركيز البادئ النهائي 0.2 ميكرومول/لتر، والذي يمكن تعديله أيضًا بين 0.1 و1 ميكرومول/لتر حسب الاقتضاء.
*** الكاشف حساس للغاية، مع إجمالي RNA في نطاق 1 بيكو جرام - 1 ميكروجرام، وأظهر اختبار العينات البشرية مدخلات مثالية تبلغ 1 بيكو جرام - 100 نانوجرام، مع التحكم في قيمة Ct الإجمالية في نطاق 15-30 حسب الاقتضاء.
**** يوصى باستخدام 20 ميكرولترًا أو 50 ميكرولترًا لضمان صحة وإمكانية تكرار تضخيم الجينات المستهدفة.
***** يُرجى التحضير في منضدة فائقة النظافة، واستخدام رؤوس وأنابيب تفاعل خالية من بقايا النوكلياز؛ ويُنصح باستخدام رؤوس مزودة بخراطيش ترشيح. تجنب التلوث المتبادل وتلوث الهباء الجوي.
2) برنامج رد الفعل
| دورة خطوة | درجة حرارة. | وقت | الدورات |
| النسخ العكسي | 50 درجة مئوية* | 6 دقيقة | 1 |
| التحلل الأولي | 95 درجة مئوية | 5 دقيقة | 1 |
| تفاعل التضخيم | 95 درجة مئوية | 15 ثانية | 40 |
| 60 درجة مئوية** | 30 ثانية | ||
| مرحلة منحنى الانصهار | الإعدادات الافتراضية للأداة | 1 | |
*يمكن اختيار درجة حرارة النسخ العكسي بين ٥٠ و٥٥ درجة مئوية وفقًا لاحتياجات التجربة. بالنسبة لعينات الحمض النووي، يمكن الاستغناء عن عملية النسخ العكسي.
** في حالات خاصة يمكن تعديل درجة حرارة التلدين/التمديد وفقًا لقيمة Tm التمهيدي، ويوصى بـ 60 درجة مئوية.
3) النموذج المطبق
نماذج الأجهزة التي لا تتطلب معايرة Rox:
بيو راد: CFX96، CFX384، iCycler iQ، iQ5، MyiQ، MiniOpticon، Opticon، Opticon 2، Chromo4؛
إيبندورف: Mastercycler ep realplex، realplex 2 s؛
كياجن: كوربيت روتور جين كيو، روتور جين 3000، روتور جين 6000؛
روش للعلوم التطبيقية: LightCycler 480، LightCycler2.0، Lightcycler 96؛
Thermo Scientific: PikoReal Cycler؛ Cepheid: SmartCycler؛ Illumina: Eco qPCR؛
الموديلات القابلة للتطبيق من Low Rox:
ABI 7500، 7500 Fast، ViiA7، QuantStudio 3 و5، QuantStudio 6، 7، 12k Flex؛
ستراتاجين MX3000P، MX3005P، MX4000P؛
موديلات High Rox المطبقة*:
أبي 5700، 7000، 7300، 7700، 7900HT سريع، ستيب ون، ستيب ون بلس.
* بالنسبة لنماذج High Rox، لاحظ أنه يجب إضافة Hieff™ SP High Rox بشكل متناسب إلى 2 × Hifair™ قم بفحص SG Buffer المتقدم قبل الاستخدام.
ملحوظات
- هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط.
- يرجى العمل بمعاطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة، من أجل سلامتك.
وثائق:
صحيفة بيانات السلامة
11175ES-ج-MSDS-HB230927.بي دي إف
الأدلة
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.