このキットは、RNAを鋳型とするマルチプレックス定量PCRキットです。実験プロセスでは、逆転写と定量PCRを同一チューブ内で実施することで、実験操作を簡素化し、コンタミネーションのリスクを低減します。

このキットでは、耐熱性Hifair ^™逆転写酵素を用いて第一鎖cDNAを効率的に合成し、UNICON™ HotStart Taq DNAポリメラーゼを用いて定量的に増幅します。キットには、最適化されたMPバッファー、酵素ミックス、GCエンハンサーなどが含まれています。バッファー溶液にはMg ²⁺とdNTPが含まれています。さらに、非特異的PCR増幅を効果的に抑制し、複数回のqPCR反応の増幅効率を向上させる因子を添加することで、増幅効率を確保し、複数回の増幅反応まで対応可能です。dUTP/UDGシステムを追加することで、エアロゾル汚染のリスクを効果的に防止します。

特徴

• 高い汎用性 - 病原微生物、ヒトゲノム、植物など、複数の種の核酸のワンステップ RT-qPCR 検出に適しています。
• 高感度: 慎重に最適化されたバッファー システムにより、最大 250 コピー/mL までの低濃度テンプレートの検出感度が向上します。
• dUTP/UDG 汚染防止システム: dUTP/UDG 汚染防止システムを導入し、製品のエアロゾル汚染を効率的に低減し、偽陽性を減らし、正確な結果を保証します。
• 高速プログラムをサポート: 高速プログラムと互換性があり、30 分で結果を生成できます。
• 優れた安定性: 37°C で 14 日間、長距離輸送、10 回の凍結融解サイクル後も安定したパフォーマンスを発揮します。

仕様

コンポーネント

[注記]: 1) 5×Hifair ^TM MP Buffer は、Hifair ^TM V2 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer の略称で、dNTP、dUTP、Mg2+、安定剤などが含まれています。

2) Hifair ^TM酵素ミックスには、主に Hifair ^TM逆転写酵素、UNICON ^TM HotStart Taq DNA ポリメラーゼ、RNase 阻害剤、UDGase などが含まれています。

3) GC-Enhancerは状況に応じてシステムに追加するかどうかを決定できます

配送と保管

この製品は-25～-15℃で1年間保管してください。

応用

RT-qPCR検出；診断病原体検出（呼吸器系、腸管系など）；動物病原体検出（非豚コレラなど）；食品検査（微生物など）

数字

1.優れた増幅性能

図1.増幅効率試験

16630線形範囲結果：増幅効率は90％〜110％を満たし、標準曲線の傾きが3.3のときのテンプレート範囲は10 ⁶コピー/μL〜10 -2コピー/ μL^です。

希釈勾配は合計 8 つあり、サプライヤー A*の最低濃度は検出されませんでした。

2.高い検出率

図2. 異なるブランドのRT-qPCRキットの増幅性能の比較

呼吸器系ターゲットにおいて 16630 および他社の類似製品を使用した勾配サンプルの増幅の結果、検出率、蛍光ピークの増加、Ct 値などの点で 16630ES の方が優れていることが示されました。

3.高感度

図3. 感度比較テスト

パラインフルエンザ 4 重プライマープローブを使用して、パラインフルエンザ T7-RNA プラスミドの 20 個の複製ウェルをテストしたところ、病原体 4 重ターゲット増幅の感度は 0.25 コピー/μL に達する可能性があることが示されました。

4.高い阻害剤耐性

図4. 阻害剤耐性試験

16630 とサプライヤー A は 4% エタノールに完全に耐え、4% 全血は両方を同様の程度に阻害しました。

5.安定性試験

図5. 熱加速安定性試験(A)と凍結融解安定性(B) 

（あ） 加速安定性試験：
単成分型16630試薬（緩衝液と酵素の2本入り）の酵素および緩衝液成分を4℃および37℃で14日間保存した。四重鎖病原体およびヒト標的検出において、増幅性能は-20℃保存時と比較して有意な差を示さず、十分な安定性を示した。

（B） 凍結融解安定性評価：
ドライアイスと-20℃の保存条件を用いて10回の凍結融解サイクルを実施した後、増幅性能を評価しました。病原体とヒトの四重鎖標的の両方を試験しました。結果は、すべての標的セットにおいて、両方の凍結融解条件下で十分な安定性を示しました。

文書:

安全データシート

16630_MSDS_HB20250530_EN.PDF

マニュアル

16630_マニュアル_Ver.EN20241114.pdf