{"product_id":"92676","title":"Human Th1 Cell Polarization Kit _ 92676ES","description":"\u003cp\u003eThis kit is designed for the in vitro directed differentiation of human naive CD4⁺ T cells\/PBMCs into high-purity functional Th1 cells. It recapitulates the physiological microenvironment in which dendritic cells drive Th1 differentiation in vivo. The pre-optimized, ready-to-use reagent set eliminates the need for customers to formulate cytokines and blocking antibodies themselves, offering a standardized differentiation protocol with stable polarization efficiency.\u003c\/p\u003e\n\u003ch3\u003e\n\u003cb\u003e\u003cspan\u003eProduct Components\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003ctable class=\"MsoNormalTable\" border=\"0\" cellspacing=\"0\"\u003e\n\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"123\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eCat. No.\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eComponent Name\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"135\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eAppearance\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"157\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eRecommended Working Concentration\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e92676ES10 (10 mL System)\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e92676ES60 (100 mL System)\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"123\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e92676ES-A\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eHuman IL-2 Protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"135\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eLyophilized Powder\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"157\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e40 ng\/mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e5 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e5 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"123\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e92676ES-B\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eHuman IL-12 Protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"135\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eLyophilized Powder\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"157\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e20 ng\/mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e5 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e5 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"123\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e92676ES-C\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eanti-human CD3 mAb\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"135\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eLiquid\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"157\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e5 μg\/mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e50 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e500 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"123\" 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class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e100 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"123\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e92676ES-E\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eAnti-human IL-4 mAb\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"135\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eLiquid\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"157\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e10 μg\/mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e100 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e1 mg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"123\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e92676ES-F\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eAnti-human IFN-γ mAb\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"135\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eLiquid\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"157\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e10 μg\/mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e100 μg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e1 mg\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"123\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e92676ES-G\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e\u003cspan style=\"font-family: Inter;\"\u003eβ-Mercaptoethanol (14.3 M)\u003c\/span\u003e\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"135\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eLiquid\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"157\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e55 μM\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e100 μL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"138\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e100 μL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003ch3 class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\n\u003cb\u003e\u003cspan\u003eHuman Th1 Cell Polarization Induction Protocol:\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e1. Coat anti-human CD3 mAb for T Cell Activation\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e1.1 Dilute anti-human CD3 mAb to the working concentration (5 μg\/mL) using sterile PBS.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e1.2 Add the diluted anti-human CD3 mAb at 1 mL per well to a 24-well cell culture plate for coating. Incubate at 37°C for 2 hours or at 4°C overnight.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e2. Seed Cells and Initiate Th1 Polarization\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e2.1 The next day, aspirate the coating solution and gently wash the plate 2-3 times with pre-chilled sterile PBS to remove unbound antibodies.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e2.2 Resuspend naive CD4⁺ T cells isolated using a CD4⁺ T Cell Isolation Reagent (CD4 Nanobeads, Cat. No. 37605ES10) in complete Th1 polarization medium at a density of 1×10⁶ cells\/mL.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003eComplete Th1 polarization medium: RPMI-1640 basal medium supplemented with 10% FBS, 55 μM β-mercaptoethanol, 40 ng\/mL recombinant human IL-2, 20 ng\/mL recombinant human IL-12, 10 μg\/mL anti-human IL-4 functional antibody, and 1 μg\/mL anti-human CD28 mAb.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e2.3 Seed 1 mL of the cell suspension into each well of the pre-coated 24-well plate. Incubate at 37°C in a humidified incubator with 5% CO₂.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e3. Culture Maintenance and Cell Expansion\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e3.1 After 48 hours of culture, gently pipette to collect the cell suspension and centrifuge at 300×g for 5 minutes.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e3.2 Discard the supernatant, resuspend the cells in fresh complete Th1 polarization medium, adjust the cell density to 3×10⁵ cells\/mL, and reseed into new plates for continued culture.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e3.3 Thereafter, monitor cell density and morphology under an inverted microscope every 12 hours. If the cell density becomes too high (e.g., \u0026gt;2×10⁶ cells\/mL), perform a half-medium exchange or split the cells into new wells at an appropriate ratio, supplementing with fresh complete Th1 polarization medium (without additional anti-human CD28 mAb) to maintain optimal cell growth.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e4. Cell Restimulation and Intracellular Cytokine Capture\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003eOn day 5 of culture, collect the cells and wash once with pre-chilled PBS. Resuspend the cells in complete RPMI-1640 medium containing 10 ng\/mL PMA, 1 μg\/mL ionomycin, and 10 μg\/mL brefeldin A, adjust the density to 1×10⁶ cells\/mL, and incubate protected from light at 37°C, 5% CO₂ for 5 hours of co-stimulation.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ch3 class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\n\u003cb\u003e\u003cspan\u003eNegative Control (Th0) Setup\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003eTo assess polarization specificity, a Th0 negative control should be set up in parallel. The procedure is essentially identical to that of the Th1 induction group, with the main difference being the medium used:\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003eTh0 maintenance medium: RPMI-1640 basal medium supplemented with 10% FBS, 55 μM β-mercaptoethanol, 10 μg\/mL anti-human IL-4, 10 μg\/mL anti-human IFN-γ, 40 ng\/mL IL-2, and 1 μg\/mL anti-human CD28 mAb.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003eNote: No polarizing cytokines are added to this medium. Apart from this difference, cell seeding, medium exchange, and density monitoring are identical to those of the Th1 induction group.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ch3 class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\n\u003cb\u003e\u003cspan\u003eFlow Cytometry Analysis\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e1. Cell collection: After induction, discard the culture supernatant, wash the cells once with PBS, discard the supernatant, and gently resuspend the adherent cells in PBS by pipetting.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e2. Cell counting: Count the cells using an automated cell counter to determine the total cell number, centrifuge at 300×g for 5 minutes, and discard the supernatant.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e3. Viability dye staining: Add the diluted Fixable Viability Dye 452 at 100 μL per 1×10⁶ cells (refer to the product manual for dilution instructions).\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e4. Cell washing: Wash the cells with PBS, centrifuge at 300×g for 5 minutes, and remove residual viability dye.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e5. Cell fixation: Resuspend the cells in PBS at 1×10⁷ cells\/mL, dispense 100 μL per well into a 96-well plate, centrifuge at 300×g for 5 minutes, and discard the supernatant. Add 200 μL of 4% PFA per well and incubate at room temperature protected from light for 15 minutes.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e6. Cell washing: Centrifuge at 300×g for 5 minutes and discard the supernatant. Add 200 μL of PBS per well and centrifuge at 300×g for 5 minutes to wash the cells and remove residual fixative.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e7. Cell permeabilization: Add 200 μL of fixation\/permeabilization solution (BD 554714) per well and incubate at 4-8°C for 30 minutes.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e8. Cell blocking: Add 100 μL of 1× BD Perm\/Wash™ Buffer per well with Human IgG for blocking (steps 7 and 8 may be performed simultaneously), then centrifuge at 300×g for 5 minutes and discard the supernatant.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e9. Antibody incubation: Add 100 μL of 1× BD Perm\/Wash™ Buffer per well with FITC Mouse Anti-Human IFN-γ Antibody (refer to the antibody manual for the recommended amount).\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e10. Cell washing: Centrifuge at 300×g for 5 minutes and discard the supernatant. Add 200 μL of PBS per well and centrifuge at 300×g for 5 minutes to wash the cells and remove residual antibodies, then resuspend the cells in 100-200 μL.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e11. Proceed to flow cytometry acquisition.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ch3 class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\n\u003cb\u003e\u003cspan\u003eNotes\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e1. For your safety and health, wear a lab coat and disposable gloves during operation. This product is for research use only.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e2. Optional medium supplements: 1% sodium pyruvate, L-glutamine, HEPES, and penicillin-streptomycin.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ch3\u003e\n\u003cb\u003e\u003cspan\u003eProduct Properties\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003ctable class=\"MsoNormalTable\" border=\"0\" cellspacing=\"0\"\u003e\n\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"273\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eItem\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"557\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eSpecification\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"273\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eSpecies\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"557\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eHuman\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"273\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eTag\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"557\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eNo Tag\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"273\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eEndotoxin\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"557\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003e\u0026lt; 1.0 EU\/μg protein as determined by LAL method.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"273\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eReconstitution Method\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"557\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eHuman IL-2 and Human IL-12 proteins: Briefly centrifuge the vial before opening to collect the contents at the bottom. Reconstitute in ultrapure water to a concentration of 0.1-1.0 mg\/mL, which may be further diluted for subsequent experiments.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003ch3\u003e\n\u003cb\u003e\u003cspan\u003eFeatures\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e\u003cspan style=\"font-family: Inter;\"\u003e• Precisely optimized formulation with high directed differentiation efficiency.\u003c\/span\u003e\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e\u003cspan style=\"font-family: Inter;\"\u003e• Fully human-origin components with excellent cell viability.\u003c\/span\u003e\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\" align=\"justify\"\u003e\u003cspan\u003e\u003cspan style=\"font-family: Inter;\"\u003e• Stringent lot-to-lot quality control for stable experimental reproducibility.\u003c\/span\u003e\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ch3\u003e\n\u003cb\u003e\u003cspan\u003eApplications\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003cdiv style=\"text-align: center;\"\u003e\n\u003cimg src=\"https:\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0803\/9419\/1166\/files\/11_9e67cbcf-dfe5-4d22-80a3-75e91d622143_1024x1024.png?v=1789461004\" alt=\"Figure 1. Flow cytometry analysis of IFN-γ expression in Th0 (left) and Th1 (right) polarized human CD4⁺ T cells. Th1 polarization efficiency: 65.2% (Th0: 0.32%).\" style=\"margin-bottom: 16px; float: none;\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e \u003cbr\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eFigure 1. Flow cytometry analysis of IFN-γ expression in Th0 (left) and Th1 (right) polarized human CD4⁺ T cells. Th1 polarization efficiency: 65.2% (Th0: 0.32%).\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\n\u003c\/div\u003e\n\u003ch3\u003e\n\u003cstrong\u003eStorage\u003c\/strong\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\n\u003c\/h3\u003e\n\u003ctable class=\"MsoNormalTable\" border=\"0\" cellspacing=\"0\"\u003e\n\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"415\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eComponent\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"415\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cb\u003e\u003cspan\u003eStorage Condition\u003c\/span\u003e\u003c\/b\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"415\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eHuman IL-2 Protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eHuman IL-12 Protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eanti-human CD3 mAb\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eanti-human CD28 mAb\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eAnti-human IL-4 mAb\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eAnti-human IFN-γ mAb\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"415\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eStore at -25 to -15°C, valid for 1 year upon receipt. Avoid repeated freeze-thaw cycles.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd width=\"415\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003eβ-Mercaptoethanol\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd width=\"415\" valign=\"center\"\u003e\n\u003cp class=\"MsoNormal\"\u003e\u003cspan\u003eStore at 2-8°C.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cp\u003e \u003c\/p\u003e","brand":"Yeasen","offers":[{"title":"10 mL","offer_id":54454247784766,"sku":"92676ES10","price":405.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"100 mL","offer_id":54454247817534,"sku":"92676ES60","price":855.0,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0803\/9419\/1166\/files\/universe_b9e9ebcb-b5e9-497a-b61d-dc198ade0f05.jpg?v=1754453675","url":"https:\/\/www.yeasenbio.com\/da\/products\/92676","provider":"Yeasen - Leading Innovation in Molecular Enzymes and Reagents","version":"1.0","type":"link"}