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Recombinant DNase I (RNase-free)10325ES80
物品单位 品牌
Yeasen
  • 型号:1000 U
  • 货号:10325ES80
  • 发布日期: 2022-04-28
  • 更新日期: 2022-04-28
产品详细说明
产地
品牌 Yeasen
货号 10325ES80
用途范围
英文名称
纯度 %
CAS编号
规格 1000 U
保质期
是否进口

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Recombinant DNase I (RNase-free)

10325ES80

1,000 U

495.00

10325ES90

5,000 U

2,155.00

产品描述

DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA的核酸内切酶。它水解磷酸二酯键,产生含有5'-磷酸基团和3'-OH基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸。

DNase I 的工作pH范围是7-8,DNase I的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。在Mg2+存在下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;而在Mn2+存在的条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端或有1-2个核苷酸突出的粘末端。

本酶来源于重组 E. coli 菌株,不含RNase,可以用于各种RNA样品的处理。

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

10325ES80 (1,000 U)

10325ES90 (5,000 U)

10325-A

Recombinant DNase I (RNase-free) -2 U/μL

500 μL

5×500 μL

10325-B

DNase I Reaction Buffer(10×)

1 mL

5×1 mL

运输和保存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期2年。推荐分装保存,避免反复冻融。

产品应用

1.RNA提取:制备不含DNA的RNA;

2.用RNA聚合酶,如T7 RNA Polymerase(Cat#10618)进行体外转录后,用于去除模板DNA;

3.在进行 RT-PCR和RT-qPCR之前制备无DNA的RNA;

4.与DNA Polymerase I(Cat#12903)配合使用,用于缺口平移法标记DNA;

5.用于足迹法进行分析DNA-蛋白质相互作用;

6.生成随机片段文库;

7.细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。

酶活定义

37℃,10 min,完全分解1 μg质粒DNA所需要的酶量。

注意事项

1. DNase I对物理变性敏感,混合时轻轻颠倒试管摇匀,请勿剧烈振荡;

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

3. 本产品仅做科研用途;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


DNase Ⅰ储存溶液

10 mM Tris-HCl(pH 7.6),2 mM CaCl2,50%甘油。

DNase Ⅰ失活或抑制

加入EDTA至终浓度为2.5 mM后,65℃加热10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原剂,50-100 mM以上盐浓度均对DNase Ⅰ有显著抑制作用。

使用方法(应用于RNA样品中DNA的去除实验,仅供参考)

1. 反应体系:

请使用RNase-free离心管及枪头配制如下反应体系:

组分名称

体积(μL)

DNase I Reaction Buffer(10×)

1

Recombinant DNase I (RNase-free) -2 U/μL

1

RNA

X

RNase-free ddH2O

Up to 10

2. 反应条件:
37℃,15-30 min后,加入终浓度2.5 mM EDTA溶液混匀后65℃ 10 min。处理后的模板可用于后续RT-PCR或RT-qPCR等。

HB220419