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Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit(加A法) 11148es
物品单位 品牌
Yeasen
  • 发布日期: 2021-12-22
  • 更新日期: 2022-03-24
产品详细说明
产地
品牌 Yeasen
货号
用途范围
纯度 %
CAS编号
别名
规格
分子式
产品英文名称
是否进口

产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit(加A法)

11148ES10

10 T

995.00

11148ES50

50 T

3,985.00

 

产品描述

 

microRNA是一类被广泛关注的非编码RNA,长度为22 nt左右,对植物和动物的基因表达有着非常重要的调控作用。本试剂盒采用加A尾法来进行miRNA第一链cDNA的反转录,产品中的2×Hifair® miRNA RT buffer包含了miRNA加A尾反应和逆转录反应的所有原料和引物,并经过精心优化,可保证miRNA 3'末端的Poly(A)修饰过程和逆转录过程同时高效进行。

本产品推荐与本公司的Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(Cat#11171)配套使用,以获得最优的实验结果。

 

产品组分

 

组分编号

组分名称

产品规格

11148ES10(10 T)

11148ES50(50 T)

11148-A

Hifair® miRNA RT enzyme mix

17.5 μL

87.5 μL

11148-B

2×Hifair® miRNA RT buffer

50 μL

2.5 mL

11148-C

RNase-free H2O

2 mL

100 mL

11148-D

Universal Reverse Primer (10 μM)

40 μL

2 mL

11148-E

U6 Forward Primer (10 μM)

40 μL

200 μL

11148-F

U6 Reverse Primer (10 μM)

40 μL

200 μL

 

运输与保存方式

 

冰袋运输。 -20℃保存,有效期1年。

 

操作步骤

 

一、体系配制

室温融化Hifair® miRNA RT enzyme mix和2×Hifair® miRNA RT buffer后轻微颠倒混匀,置于冰上并按下表配置反应体系:

组分

体积 (μL)

终浓度

2×Hifair® miRNA RT buffer

5

Hifair® miRNA RT enzyme mix

1.75

-

RNA*

-

X

RNase-free H2O

Up to 10

-

*总RNA及提取的miRNA的浓度范围10 pg-2 μg,合成的miRNA拷贝数最低可达60 copies,投入体积不超过3.25 μL。

 

二、逆转录程序

移液器轻轻混匀上述配制的反应液,按下表程序进行miRNA的逆转录反应:

反应温度

反应时间

备注

37℃

50 min

miRNA加A尾及反转录过程

85℃

5 sec

酶失活过程

【注】:逆转录产物可直接进行下游qPCR检测。为避免逆转录体系对qPCR反应的抑制,可将产物稀释10-1000倍后使用。若短时间内不进行下游实验,可放置于-20℃保存。若长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

 

注意事项:

 

1)使用前,将冻存的各组分充分融解并轻轻混匀后使用。

2)实验时,请使用无RNase污染的耗材,避免不必要的损失影响实验结果。

3)本产品避免反复冻融,配制时应避免强光照射。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5)本产品仅作科研用途!

 

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产品名称

产品编号

规格

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