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| 物品单位 | 品牌 |
|---|---|
| 块 | Yeasen |
- 产地：China
- 发布日期： 2021-06-04
- 更新日期： 2022-01-30
| 产地 | China |
| 品牌 | Yeasen |
| 货号 | |
| 用途范围 | |
| 纯度 | % |
| CAS编号 | |
| 别名 | |
| 规格 | |
| 分子式 | |
| 产品英文名称 | |
| 是否进口 |
产品信息
|
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module 快速末端修复/A尾添加模块 |
12608ES24 |
24 T |
3865.00 |
|
12608ES96 |
96 T |
11765.00 |
产品描述
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module是针对Illumina®高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块，具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容1 ng-1 μg片段化Input DNA，可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5'端磷酸化和3'端加A尾反应，得到5'末端含磷酸基团且3'末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化，即可使用Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）进行文库构建接头连接反应。
本产品已与Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文库构建，通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
24 T |
96 T |
|
12608-A |
End Repair/dA-Tailing Buffer |
144 μL |
576 μL |
|
12608-B |
End Repair/dA-Tailing Enzyme |
96 μL |
384 μL |
质量控制
Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme
1. SDS-PAGE纯度：>95%。
2. 核酸内切酶活性：50 μL反应体系中加入10 μL本酶和1 μg φX174 RF I DNA，37°C孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比率<10%。
3. 磷酸酶活性：在磷酸酶活性检测缓冲液中加入10 μL本酶和2.5 mM对硝基苯磷酸，37°C孵育4小时。经光谱测定法检测，405 nm处无对硝基苯阴离子特征吸收峰。
4. 功能活性：在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme中加入1 μL本酶和0.5 μg包含5'和3'突出末端的片段化DNA，25°C孵育20分钟。经毛细管电泳检测，末端修复、加dA尾并磷酸化的DNA比率>95%。
Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer
1. 16小时孵育检测：50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg HindIII-λDNA，37°C孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，条带无降解；50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg T3 DNA，37°C孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，条带无降解。
2. 核酸内切酶活性：50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg φX174 RF I DNA，37°C孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，RF II转化比<10%。
3. RNase活性：在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer中加入40 ng FAM-RNA，37°C孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，条带无降解。
4. 磷酸酶活性：在磷酸酶活性检测缓冲液中加入1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和2.5 mM对硝基苯磷酸，37°C下孵育4小时。经光谱测定法检测，405 nm处无对硝基苯阴离子特征吸收峰。
测序验证
本品与Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace® High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文库构建，已通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。
运输与保存方法
冰袋运输。
-20℃保存，有效期1年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 将表1中各试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1 末端修复/dA尾添加PCR反应体系
|
名称 |
体积（μL） |
|
Fragmented DNA |
x |
|
End Repair/dA-Tailing Buffer |
6 |
|
End Repair/dA-Tailing Enzyme |
4 |
|
ddH2O |
Up to 60 μL |
3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。
4. 将上述PCR管置于PCR仪，设置表2所示反应程序，进行末端修复/dA尾添加反应。
表2 末端修复/dA尾添加PCR反应程序
|
温度 |
时间 |
|
热盖105°C |
On |
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30°C |
20 min |
|
72°C |
20 min |
|
4°C |
Hold |
5. 产物如需纯化，可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效产品。
相关产品
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建库试剂盒 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
Hieff NGS® MaxUp Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina® |
12301ES08/24/96 |
8/24/96 T |
3826/9756/32856 |
|
Hieff NGS® MaxUpⅡ DNA Library Prep Kit for Illumina® |
12200ES24/96 |
24/96T |
6486/23567 |
|
Hieff NGS® MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina® |
12201ES24/96 |
24/96T |
4626/16626 |
|
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® |
12203ES24/96 |
24/96 T |
7486/28567 |
|
Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® |
12206ES08/24/96 |
8/24/96 T |
2355/6155/23855 |
|
文库构建磁珠 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
Hieff NGS® cfDNA Clean Beads（100~200 bp） |
12599ES08/56 |
5/60 mL |
1666/9106 |
|
Hieff NGS® Smarter DNA Clean beads (50 bp以上） |
12600ES08/56 |
5/60 mL |
1386/7586 |
|
Hieff NGS® DNA Selection Beads（Superior AMPure XP alternative） |
12601ES08/56 |
5/60 mL |
986/6286 |
|
Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit |
12603ES24/96 |
24/96 T |
616/2266 |
|
建库接头 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1 |
12615ES04/16 |
12×4/12×16 T |
1256/4536 |
|
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2 |
12616ES04/16 |
12×4/12×16 T |
1256/4536 |
|
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 3 |
12617ES04/16 |
12×4/12×16 T |
1256/4536 |
|
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 4 |
12618ES04/16 |
12×4/12×16 T |
1256/4536 |
|
Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina®,(96 Index) |
12610ES96 |
96 T |
1365 |
|
建库模块 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module |
12607ES08/24/96 |
8/24/96 T |
1423/3263/10863 |
|
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module |
12608ES24/96 |
24/96 T |
2066/6166 |
|
2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification |
12621ES24/96 |
24/96 T |
583/1783 |
|
Hieff NGS® Dual-Mode cDNA Synthesis Kit |
12250ES24/96 |
24/96 T |
4885/16485 |
|
文库定量 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix |
12302ES05 |
500 T |
1526 |
|
Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, DNA Standard (1-6) |
12307ES09 |
6×96 μL |
2126 |
|
dsDNA HS Assay Kit for Qubit® |
12640ES60/76 |
100/500 T |
686/2696 |
|
多重PCR |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
|
Hieff® Multiplex PCR Kit |
12279ES50/76 |
100/500 T |
875/3165 |
|
Hieff® Multiplex PCR Master Mix |
12280ES50/76 |
50 /200 T |
875/3165 |
HB190103
