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Hieff NGS®UltimaTM Endprep Mix 快速末端修复/A尾添加模块 12605ES
物品单位 价格 品牌
4233 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:12605ES24
  • 发布日期: 2020-03-23
  • 更新日期: 2022-01-30
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 12605ES24
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格 24 T
是否进口

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS? UltimaTM Endprep Mix

快速末端修复/A尾添加模块

12605ES24

24 T

4233.00

12605ES96

96 T

14333.00


产品描述


Hieff NGS? UltimaTM Endprep Mix是针对Illumina?与MGI?高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块,具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容500 pg-1 μg片段化Input DNA,可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5'端磷酸化和3'端加A尾反应,得到5'末端含磷酸基团且3'末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化,即可使用Hieff NGS? UltimaTM DNA Ligation Module(Cat#12604)进行文库构建接头连接反应。

本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检,*程度保障产品优异性能与批间稳定性。


产品组分

组分编号

组分名称

24 T

96 T

12605

Endprep Mix

240 μL

960 μL


质量控制

1. SDS-PAGE纯度:>95%。

2. 核酸内切酶活性:50 μL反应体系中加入10 μL本酶和1 μg φX174 RF I DNA,37°C孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比率<10%。

3. 磷酸酶活性:在磷酸酶活性检测缓冲液中加入10 μL本酶和2.5 mM对硝基苯磷酸,37°C孵育4小时。经光谱测定法检测,405 nm处无对硝基苯阴离子特征吸收峰。

4. 功能活性:在1×Endprep Mix中加入1 μL本酶和0.5 μg包含5'和3'突出末端的片段化DNA,25°C孵育20分钟。经毛细管电泳检测,末端修复、加dA尾并磷酸化的DNA比率>95%。


测序验证

本品与Hieff NGS? UltimaTM DNA Ligation Module(Cat#12604),2×Super CanaceII High-Fidelity Mix for Library Amplification(Cat#12621)共同用于DNA文库构建,已通过Illumina?高通量平台测序验证其有效性。

本产品与Hieff NGS? UltimaTM DNA Ligation Module(Cat#12604),2× Ultima HF Amplification Mix for MGI(Cat#13344)共同用于DNA文库构建,通过MGI?高通量平台测序验证其有效性。


运输与保存方法

冰袋运输。

-20℃保存,有效期1年。


注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

1. 将表1中试剂解冻后,颠倒混匀,置于冰上备用。

2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。

表1 末端修复/dA尾添加PCR反应体系

名称

体积(μL)

Fragmented DNA

x

Endprep Mix

10

ddH2O

Up to 60 μL

3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀,并短暂离心将反应液离心至管底。

4. 将上述PCR管置于PCR仪,设置表2所示反应程序,进行末端修复/dA尾添加反应。

表2 末端修复/dA尾添加PCR反应程序

温度

时间

热盖105°C

On

30°C

20 min

72°C

20 min

4°C

Hold

5. 产物如需纯化,可使用Hieff NGS? DNA Selection Beads(Cat#12601)或AMPure XP Beads(Cat#A63880)或其他等效产品。也可以直接驳接Hieff NGS? UltimaTM DNA Ligation Module(Cat#12604)试剂盒,进行接头连接实验。

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