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MolPure® Plasmid Mini Kit 质粒小量提取试剂盒 19001ES
物品单位 价格 品牌
183 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:19001ES50
  • 发布日期: 2020-09-24
  • 更新日期: 2022-01-30
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 19001ES50
用途范围 质粒DNA提取
纯度 %
CAS编号
规格 50 T
是否进口


产品信息

产品名称

产品货号

规格

价格

MolPure® Plasmid Mini Kit 质粒小量提取试剂盒

19001ES08

5 T

询价

19001ES50

50 T

183.00

19001ES70

200 T

573.00

产品描述

MolPure® Plasmid Mini Kit采用MolPure® DNA Column P3和新型的溶液体系,使用常规碱裂解法分离质粒DNA。提取过程中不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。试剂盒内的MolPure® DNA Column P3可特异性吸附质粒DNA,不吸附蛋白质、多糖和其它非核酸类物质,具有高效、快速、方便等特点。提取到的质粒DNA纯度高,可直接用于后续酶切、转化、测序等实验。

试剂盒组分

类别

编号

组分名称

19001ES08

(5 T)

19001ES50 (50 T)

19001ES70 (200 T)

Part I

19001-A

RNase A (10 mg/mL)

15 μL

125 μL

500 μL

Part II

19001-B

缓冲液RS* (RS Buffer P3*)

1.5 mL

12.5 mL

50 mL

19001-C

缓冲液AC (AC Buffer P3)

500 μL

5 mL

20 mL

19001-D

DNA吸附柱P3 (MolPure® DNA Column P3)

5个

50个

200个

19001-E

2 mL收集管 (2 mL Collection Tube P3)

5个

50个

200个

19001-F

裂解液LB (LB Buffer P3)

1.5 mL

12.5 mL

50 mL

19001-G

结合液BD (BD Buffer P3)

1.8 mL

17.5 mL

70 mL

19001-H

去蛋白液PL*  (PL Buffer P3* )

1.6 mL

16 mL

63 mL

19001-I

漂洗液W* (Wash Buffer*)

1.3 mL

13 mL

50 mL

19001-J

洗脱液 (Elution Buffer)

1 mL

10 mL

20 mL

运输和保存方法

Part I组分冰袋运输,-20℃保存;Part II组分常温运输,室温保存。产品有效期12个月。

注意事项

1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

2. 注意观察各溶液是否有析出或浑浊(尤其冬季等室温为低温环境时),可37℃温浴复溶至溶液澄清,避免影响使用效果。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途!

实验前准备

1. 自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,无水乙醇,离心管等。

2. 除特殊指明外,所有的离心步骤均在室温完成,使用可以达到13,000 rpm转速的传统台式离心机。

3. 首次使用前,将RNase A (10 mg/mL) (19001-A)加入缓冲液RS*(19001-B)瓶中,充分混匀后使用,并做好标记。每次使用后置于4℃保存。若长期不用,置于-20℃保存。

4. 首次使用前,须在漂洗液W*(19001-I)瓶和去蛋白液PL*(19001-H)中加入量的无水乙醇,充分混匀后使用,并做好标记。

操作方法

一、样本预处理:

1. 取1.5-4.5 mL过夜培养的菌液,12,000 rpm离心30 s,弃掉上清液,收集菌体。

【注】:对于低拷贝质粒或>10 kb 的质粒,建议适当加大菌体量,并等比例增加缓冲液RS*、裂解液LB及结合液BD用量。

2. 加入250 μL缓冲液RS*,吹打或涡旋重悬菌体沉淀。

【注】:确保菌体彻底重悬。

【注】:确保缓冲液RS*中已添加RNase A。

3. 加入250 μL裂解液LB,温和上下翻转6-8次以充分裂解菌体,室温放置4 min。

【注】:此步骤不宜超过5 min。

【注】:菌体裂解应温和进行,避免造成基因组DNA剪切断裂。

【注】:裂解后的菌液应清亮粘稠。若出现浑浊,可能为菌体裂解不彻底,可考虑减少菌体使用量。

4. 加入350 μL结合液BD,立即温和上下翻转6-8次充分混匀。室温放置2 min。13,000 rpm离心10 min,小心收集上清。

【注】:加入结合液BD后立即混匀,以免出现局部沉淀。

二、质粒DNA提取:

1. 向DNA吸附柱P3中加入200 μL缓冲液AC,12,000 rpm离心1 min,弃掉废液。

【注】:处理后的DNA吸附柱P3仅限当用。

2. 将DNA吸附柱P3套入2 mL收集管中,备用。

3. 将上述上清液加入到DNA吸附柱P3中,12,000 rpm离心1 min,弃掉废液。

【注】:混合液每次最大加入体积700 μL,可分多次离心。

(选做) 加入500 μL去蛋白液PL*,12,000 rpm离心1 min,弃废液。

【注】:此步骤为了去除痕量核酸酶等杂质。

5. 将DNA吸附柱P3放回收集管,加入600 μL漂洗液W*,12,000 rpm室温离心30 s,弃废液。

【注】:确保漂洗液W*已添加无水乙醇。

6. 重复一遍步骤5。

7. 将DNA吸附柱P3放回收集管,空柱13,000 rpm室温离心2 min,以除去残留的漂洗液W*。

8. 将DNA吸附柱P3放入新的1.5 mL离心管中(自备),在DNA吸附柱P3中央加入50-100 μL洗脱液,室温放置2 min。然后12,000 rpm离心1 min。收集滤液,即为质粒DNA溶液。

【注】:可通过以下方式提高回收产量:①70℃预热洗脱液;②将DNA滤液再次上柱,室温放置2 min后,洗脱。

9. 质粒DNA溶液可置于-20℃长期保存。


HB211214