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Hieff® Multiplex PCR Kit(Mg2+ free)13278ES
物品单位 价格 品牌
875 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:13278ES50
  • 发布日期: 2020-05-15
  • 更新日期: 2022-02-07
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 13278ES50
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格 100T
是否进口

Hieff® Multiplex PCR KitMg2+ free

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff® Multiplex PCR KitMg2+ free

13278ES60

100 T

875.00

Hieff® Multiplex PCR KitMg2+ free

13278ES76

500 T

3165.00

产品描述

本产品适用于多重PCR实验。Hieff® Multiplex PCR KitMg2+ free)由多重PCR酶制剂与不含Mg2+2×扩增缓冲液组成,在进行扩增反应时,可在反应体系中根据需求添加适量Mg2+。该产品的扩增具有高均一性、高特异性和高灵敏度的特点,可以对20对及以上引物体系进行特异、均一的扩增反应。

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

13278ES60 (100T)

13278ES76 (500T)

13278-A

Hieff® Multiplex PCR Enzyme

100 μL

500 μL

13278-B

2×Hieff® Multiplex PCR Buffer (Mg2+ free)

2×1.25 mL

10×1.25 mL

13278-C

MgCl2 (25 mM)

600 μL 

1 mL

【注:13278-A组分避免反复冻融。

运输与保存方式

冰袋运输-20储存,有效期1年。

反应体系

组分

体积 (μL)

终浓

2×Hieff® Multiplex PCR Buffer (Mg2+ free)

25

1×

Hieff® Multiplex PCR Enzyme

1

-

Primer mix

x

0.1 μM-0.5 μM

模板DNA

DNA总量:1 ng-200 ng

-

MgCl225 mM

y

1-5 mM

无菌超纯水

up to 50

-

【注】: 1DNA量和引物浓度均为推荐起始投入量和浓度,可根据具体实验情况进行调整,选择最适投入量和浓度;

       2)引物浓度:建议每条引物的浓度在0.1 μM-0.5 μM参考范围内进行调整;

       3Hieff® Multiplex PCR BufferMg2+ free中已经包含扩增所需要的dNTP、盐离子等,但不包含Mg2+,需在反应体系中根据实验需求添加适量Mg2+

 

 

 

 

 

扩增程序

循环步骤

温度(

时间

循环数

预变性

94

1 min

1

变性

94

30 sec

15-45

退火

50-60

60 sec

延伸

72

60 sec/kb

终延伸

72

10 min

1

【注】: 1PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应(设置热盖温度至105左右)

       2)使用本产品获得的扩增产物需添加Loading buffer后用于电泳检测。

       3)延伸时间以最长扩增片段为准,可适当延长延伸时间,但要避免过长时间带来的非特异性扩增。

实验案例分享

以人基因组DNA为模板,使用10对引物进行多重PCR反应,分别扩增97 bp139 bp181 bp212 bp268 bp331 bp415 bp507 bp741 bp1172 bp的目的片段。

扩增体系配制

扩增程序设置

组分

体积

终浓


循环步骤

温度

时间

循环数

Hieff® Multiplex PCR Buffer

(Mg2+ free)

25 μL 

1×


预变性

94

1 min

1

Hieff® Multiplex PCR Enzyme

1 μL

-


变性

94

30 sec

35

Primer mix

10 μL

0.1 μM-0.5 μM


退火

60

60 sec

模板DNA100 ng/μL

1 μL

2 ng/μL


延伸

72

60 sec

MgCl225 mM

5 μL

2.5 mM


终延伸

72

10 min

1

无菌超纯水

to 50 μL

-






电泳检测

2%琼脂糖凝胶;130 V;电泳时间1 h

实验结果

 

Lane 1100bp DNA marker

Lane 2-310PCR产物

HB200512