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iFluor™ 488 phalloidin iFluor488标记鬼笔环肽(绿色) 40736ES
物品单位 价格 品牌
1853 Yeasen
  • 产地:China
  • 型号:300T
  • 货号:40736ES75
  • cas:17466-45-4
  • 发布日期: 2020-03-23
  • 更新日期: 2022-05-13
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 40736ES75
用途范围 荧光探针/细胞或细菌染色
纯度 %
CAS编号 17466-45-4
规格 300T
是否进口

产品信息

产品名称

产品编号

规格

外观

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价格(元)

促销价

iFluorTM 488 phalloidin iFluor™ 488标记鬼笔环肽(绿色)

40736ES75

300 T

液体

-20℃避光保存

2126.00

1853.00


背景描述

鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片、细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色|区域和非染色|区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15?,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。

鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1 μg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。

本品为iFluorTM 488标记的鬼笔环肽,可发出高亮度、光稳定的绿色荧光,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。iFluorTM 488 鬼笔环肽染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容,包括荧光蛋白、Qdot® 纳米晶体和其他iFluorTM偶联物(包含iFluorTM偶联二抗)。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。

本品以粉末小颗粒形式提供,请使用30uL的DMSO溶解配置成1mg/mL体系。


产品性质

分子量(Molecular Weight)

~1900

*激发/发射波长(Ex/Em)

493/517 nm

溶解性(Solubility)

溶于DMSO

结构式(Structure)

1.jpg


运输与保存方法

冰袋运输。收到货后-20℃避光干燥保存,1年有效。


注意事项

1)鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量LD50约2 mg/kg)。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

需要自备材料

1)1×PBS缓冲液, pH 7.4, 细胞培养级别(货号:60145ES76)

2)固定液4%多聚甲醛(不含甲醇)(溶于PBS缓冲液)(货号:36314ES60)

3)透化液Triton X-100 (溶于PBS缓冲液)

4)BSA,标准级别(货号:36101ES25)

5)DAPI染液(即用型)(货号:40728ES50)


操作步骤

1. 1×工作液准备

吸取1μL 1000×iFluorTM 488标记鬼笔环肽(溶于DMSO)到1 mL 含有1%BSA的PBS缓冲液中即可得到1×工作液。

注:1)使用前需将1000×DMSO iFluorTM 488 鬼笔环肽储存液分装并于-20℃避光干燥保存。

2)不同的细胞染色情况不同,相应iFluorTM 488鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。

2. 染色步骤

1)细胞培养过夜或更长,使其密度达到50-60%汇合度。

2)吸掉培养液,37℃预热的1×PBS(pH 7.4)清洗细胞2次。

3)使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定10-30 min。

注意:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。

4)室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10 min。

5)(可选):室温条件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化处理3-5min,从而增加其通透性。

6)室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10 min。

7)取足够量新鲜配好的 iFluorTM 488标记鬼笔环肽工作液以覆盖住细胞,如:100 μL/孔(96孔板),室温避光染色20-90 min。

8)用PBS清洗细胞3次,每次5 min。

9)(可选):加入足量的即用型DAPI溶液对细胞核进行复染,如:100 μL/孔(96孔板),室温3~5 min。用PBS清洗细胞2次,每次5 min。

10)于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择iFluorTM 488激发/发射滤片(Ex/Em=493/517 nm)和/或DAPI激发/发射滤片(Ex/Em=364/454 nm)。


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