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Lymphocyte Separation Medium 1.077 分离液1.077 40503ES
物品单位 价格 品牌
219 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:40503ES60
  • 发布日期: 2020-03-20
  • 更新日期: 2022-02-07
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 40503ES60
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格 100mL
是否进口


产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴细胞分离液1.077

40503ES60

100 mL

219.00

40503ES76

5×100 mL

989.00

产品描述

淋巴细胞分离液(Lymphocyte Separation Medium, LSM)是一种滤膜除菌的即用型分离液,用于体外分离人外周血淋巴细胞,也可以从其他组织中分离淋巴细胞,包括脐带血和骨细胞等。

每100 mL包含6.2 g聚蔗糖和9.4 g泛影酸钠。20℃下密度是1.0770-1.0800 g/mL。

工作原理

用去纤维蛋白或肝素处理人血,以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30 min。离心过程中,由于差速迁移最终形成不同的细胞层。

红细胞和多形核粒细胞,它们通过梯度迁移至管底。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收,最后进一步清洗去除血小板,LSM和血浆。

运输与保存方法

室温运输、保存(15-30 °C),有效期2年。

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

2)稀释去纤维蛋白血液或肝素化血液用的生理盐水为无菌液体;

3)为保持淋巴细胞的活性,应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层,包括淋巴细胞和单核细胞。

4)本产品仅作科研用途!

操作方法

(用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人体血液;对于其他物种或者其他组织的血液,需要对此程序做出一定的改进)

1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合。

2. 无菌条件转移3 mL LSM到15 mL离心管中。

3. 用2 mL生理盐水混合2 mL去纤维蛋白血液或肝素化血液。

4. 小心将稀释血液加入含有3 mL LSM(室温)的15 mL离心管中,在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。

5. 室温下400×g离心15-30 min,离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞,同时可以在LSM上形成一层单核淋巴细胞,如下图所示(分层情况从上到下依次为血浆层-单个核细胞层-LSM层-RBC颗粒)。

6. 吸出淋巴细胞层上方2-3 mm的血浆。

7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM层,并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中,室温(18-25°C)离心10min,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞的范围,例如160-260×g(清洗去除LSM,并降低血小板的百分比)。

8. 再用平衡盐缓冲液清洗细胞,最后取适当的培养基(实验者所用)重悬细胞。

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