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Streptavidin Agarose Resin 6FF 链霉亲和素琼脂糖纯化树脂 20512ES
物品单位 价格 品牌
1586 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:20512ES08
  • 发布日期: 2020-03-20
  • 更新日期: 2022-01-30
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 20512ES08
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格 5 mL
是否进口

产品信息

产品名称      

产品编号

规格

储存

价格(元)

Streptavidin Agarose Resin 6FF 链霉亲和素琼脂糖纯化树脂

20512ES08

5 mL

4℃

1586.00

Streptavidin Agarose Resin 6FF 链霉亲和素琼脂糖纯化树脂

20512ES25

5×5 mL

4℃

6356.00

Streptavidin Agarose Resin 6FF 链霉亲和素琼脂糖纯化树脂

20512ES60

100 mL

4℃

16796.00


产品描述

Streptavidin Agarose Resin 6FF是一种生物素或生物素化的蛋白、抗体等物质的纯化树脂,其作用原理是基于链霉亲和素与生物素之间的相互作用,将链霉亲和素高度交联于6%琼脂糖上,独特的制备工艺使其具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。

由于链霉亲和素与生物之间的亲和力很强,纯化时需要在变性条件下洗脱;而链霉亲和素对亚氨基生物素的亲和力相对较弱,可以在 pH 9.5-11.0 结合,pH 4.0 时洗脱,不需要使用变性剂,所以能更好的保持亲和素偶联物的活性。


产品性质

基质(Matrix)

高度交联的6%琼脂糖微球

配体(Ligand)

链霉亲和素

粒径(Bead size)

45-165 μm

载量(Capacity)

>200 nmol   Biotin/mL介质

*压力(PressureMax)

0.3 MPa,3 bar

pH稳定范围(pH range)

2-10

储存缓冲液(Buffer)

20%乙醇


运输和保存方法

冰袋运输。4℃保存,有效期2年。

需准备试剂

所用水和Buffer在使用前*用0.22 μm或0.45 μm滤膜过滤除菌。

生物素或生物素化物质的纯化

结合/洗杂缓冲液:150 mM NaCl,20 mM NaH2PO4,pH 7.4

洗脱缓冲液:8 M盐酸胍,pH 1.5

亚氨基生物素标签物质的纯化

结合/洗杂缓冲液:50 mM碳酸铵,0.5 M NaCl,pH 10.0

洗脱缓冲液:50 mM碳酸铵,0.5 M NaCl,pH 4.0


 使用方法

注:样品在上样前*用0.22 μm或0.45 μm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子。另外,确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用结合/洗涤缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用结合/洗涤缓冲液透析。

1. Streptavidin Agarose Resin 6FF的装填(适用于各种中压色谱层析柱的填装)

1)用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头,确保柱底筛板上无气泡,关闭柱底出口,并在柱底部留出1-2 cm的去离子水。

2)将树脂悬浮起来,小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。
3)如果使用储液器,应立即在层析柱和储液器中加满水,将进样分配器放置于浆液表面,连接至泵上,避免在分配器或进样管中产生气泡。
4)打开层析柱底部出口,开起泵,使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层析柱,然后缓慢增加至最终流速, 这样可避免液压对所形成柱床的冲击,避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速,可以用所使用泵的*流速,这样也可以得到一个很好的装填效果。
注:在随后的色谱程序中,不要超过*装柱流速的75%,当柱床高度稳定后,在*的装柱流速下至少再上3倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。

5)关闭泵,关闭层析柱出口。

6)如果使用储液器,去除储液器,将分配器至于层析柱中。

7)将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器,锁紧分配器接头。

8)将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中,开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。


2.样品纯化(以?KTA为例)

1)平衡:用5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
2)上样:将样品加到平衡好的层析柱中,保证目的蛋白与树脂充分接触,提高目的蛋白的回收率,收集流出液,待检测。
3)洗杂:用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液,待检测。
4)洗脱:使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液,收集洗脱液,即目的蛋白溶液。
5)清洗及保存:依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,*再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

2 .SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。

3 .填料清洗

随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集,会造成流速和结合载量性能下降,此时需对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变形物质

用2倍柱体积的0.1 M NaOH或6 M盐酸胍或8 M尿素溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH 7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH 7.4清洗。


注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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