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Hifair® Ⅴ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix 11146ES
物品单位 价格 品牌
1563 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:11146ES50
  • 发布日期: 2020-03-19
  • 更新日期: 2022-02-07
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 11146ES50
用途范围 qPCR
纯度 %
CAS编号
规格 50 T
是否进口

Hifair® Ⅴ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix

产品名称

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hifair® Ⅴ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix

11146ES50

50 T

1563.00

Hifair® Ⅴ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix

11146ES70

200 T

5863.00


产品描述

Hifair® Ⅴ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。本试剂盒利用耐热Hifair® Ⅴ Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并以此为模板在UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase配合专门针对多重反应优化的Buffer,能够在保证引物扩增效率的同时,进行多达五重的反应。

本试剂盒以预混液形式提供,2×Hifair® Ⅴ One Step mRT-qPCR Mix包含优化的缓冲体系,添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子。


产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

11146ES50 (50 T)

11146ES70 (200 T)

11146-A

2×Hifair® Ⅴ One Step mRT-qPCR Mix

500 μL

2 mL

11146-B

RNase free ddH2O

500 μL

2 mL


运输与保存方式

冰袋运输。-20℃避光保存,有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。


注意事项

1. 实验过程中请使用RNase free耗材。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。


反应体系(以20 μL为例)

组分

体积(μL)

终浓度

2×Hifair® Ⅴ One Step mRT-qPCR Mix

10

Primer Mix (10 μM)

0.4

0.2 μM

Probe Mix (10 μM)

0.2

0.1 μM

模板 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg


RNA Free H2O

to 20 μL


】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

a)引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.2μM,也可以根据情况在0.1-1.0μM间进行调整。

b)探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。

c)模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。

d)反应体系:推荐使用20 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。

e)体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管,推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。

f) 参比ROX:ROX内参请另外购买Hieff® 50×High Rox(Cat#: 11145-C)或Hieff® 50×Low Rox(Cat#: 11145-D)。


标准扩增程序



反应阶段

温度

时间

循环数

1

逆转录

50℃a

15 min

1

2

预变性

95℃

30sec

1

3

扩增反应

95℃

10 sec

40

60℃b

30 secc

【注】

a)逆转录:对于一些复杂模板或者高GC含量的RNA模板,可将逆转录温度调整至55℃,有利于提高扩增效率。

b)扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。

c)荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。


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