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Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1U/μl) 虾碱性磷酸酶 10322ES
物品单位 价格 品牌
656 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:10322ES72
  • 发布日期: 2020-04-29
  • 更新日期: 2022-01-30
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 10322ES72
用途范围 PCR相关
纯度 %
CAS编号
规格 250 U
是否进口


产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μl) 虾碱性磷酸酶

10322ES72

250 U

656.00


产品描述

Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团,因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板。

本品为虾来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。该酶作用于末端去磷酸化,无论末端为粘端,还是平端。SAP 也可以用来降解PCR 反应中的dNTP,用于后续测序和SNP分析。


产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

10322ES72(250 U)

10322-A

Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) (1 U/μl)

250 U

10322-B

10×SAP buffer

1 ml


产品性质

来源(Source)

来自毕赤酵母,克隆有北极虾(Pandalus rorealis)的虾碱性磷酸酶基因

质量控制(Quality Control)

核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶污染

纯度(Purity)

>95%

热灭活(Thermal Inactivation)

65温浴5 min,活性完全不可逆丧失

活性定义(Unit definition)

25℃条件下,30分钟能使1 μg经Hind(产生5’突出末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定位为1个活力单位。


运输和保存方法

冰袋运输。-20保存,有效期3年


注意事项

11×SAP Buffer: 50mM Bis-Tris HCl (pH 6.0)1mM MgCl20.1mM ZnCl225℃温育。

2)热失活:65℃加热5分钟,不可逆失活。当完成去磷酸化反应后,无需纯化产物,可以直接用于后续连接反应。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4) 本产品仅作科研用途!


使用方法

DNA去磷酸化

EP管中加入下列试剂*:

组分

体积

DNA 片段**

1 pmol

10×SAP buffer

2 μl

Shrimp Alkaline Phosphatase (1 U/μl)

1 μl

无菌ddH2O

Up to 20 μl

*可根据比例相应放大反应体系。

**1 pmol DNA段量约相当于1ug 3kb大小的质粒。

混匀上述试剂,于25孵育30 min

EP管655 min温浴,终止反应。


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货号

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HB210824